初次卵裂时间是猪克隆胚胎发育潜能的重要标识-生物化学与生物物理.PDFVIP

生物化学与生物物理进展 Progress in Biochemistry and Biop hys ics 2010, 37(12): 1339~ 1345 次卵裂时间是猪克隆胚胎发育潜能的重要标识* 1)** 2)** 1) 1) 1) 罗学明 肖 炜 冯 冲 龙 川 闫 军 2) 2) 1)*** 薛振华 云 鹏 潘登科 1) 2) ( 国农业科学院北京畜牧兽医研究所，北京100193 ； 北京市畜牧兽医总站，北京100107) 摘要 初次卵裂时间与哺乳动物胚胎发育潜能有关 比较了不同初次卵裂时间(20～24 h ，早期；25～36 h， 期；37～48 h， 晚期；20～48 h，对照) 的猪孤雌(parthenogenetic ，PA) 、体细胞核移植(somatic cell nuclear transfer，SCNT)胚胎的囊胚发育 率、扩张囊胚发育率和囊胚细胞数，评价其体外发育能力 发现早期卵裂的PA 胚胎发育到第6 天的囊胚发育率显著高于 期、晚期以及对照组(P 0.05；54.0% vs . 19.6%，5.4% ，18.7%) 扩张囊胚发育率，早裂胚胎同样优于其他组 早期卵裂的 SCNT 胚胎发育到第6 天的囊胚比率高于中期卵裂胚胎(32.2% vs . 23.5%)，而晚期卵裂胚胎发育到囊胚的比率最低(6.3%) 早 期卵裂的SCNT 胚胎发育到第6 天的扩张囊胚比率显著高于其余各组(P 0.05 ；18.9% vs . 5.9% 、3.1%、7.4%) 囊胚细胞数 在早期、 期、晚期三组之间表现出下降趋势 将早期卵裂的SCNT 胚胎与未经挑选的对照组胚胎分别进行移植，观察其体 内发育能力 移植早裂SCNT 胚胎的受体在产仔数和克隆效率上均明显高于未经挑选胚胎的受体(4.7 vs . 2.1；3.9% vs . 0.9%)， 说明早裂胚胎着床后具有更强的发育能力 以上结果表明：初次卵裂时间可以作为猪克隆胚胎发育潜能的重要标识，选择早 裂的胚胎进行移植，有助于提高克隆效率 关键词 猪，体细胞核移植，初次卵裂时间，发育潜能 学科分类号 Q813.7 DOI: 10.3724/SP.J.1206.20 10.00115 世界首例体细胞克隆猪在2000 年诞生[1-3] 随 一早期阶段，目前没有一个有效的评价方法来预测 [4-5] 后，人们又利用体细胞克隆技术生产转基因猪 、 早期胚胎的发育潜能 考虑到当前体外培养条件 基因组修饰(如基因打靶)猪等[6-8] 但是，克隆效率 ，克隆胚胎发育能力较差的原因，每头受体母 一般在1%左右，仅少数几个实验组的克隆效率超 猪需移植 100 枚以上的克隆胚胎，确保其妊娠维 [9-11] 为了提高克隆效率，克隆技术的很多 [8, 10-12] 我们在猪克隆胚胎体外培养的过程中发 过了1% 持 环节都进行了不断改进，包括供体细胞的选择及其 现：猪克隆胚胎体外培养初次卵裂(2 细胞期) 的时 [12-13] [14] 同期化 、卵母细胞的体外成熟条件 、供体细 间是不一致的，从激活后20 h 左右，部分胚胎开