免疫斑点试验.pptVIP

下载本文档

9
0
约小于1千字
约 10页
2017-09-14 发布于湖北
举报
版权申诉

免疫斑点试验.ppt

1、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。。
2、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
3、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
4、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
5、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
6、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
7、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

4.免疫斑点试验

* 免疫酶斑点试验 Dot-ELISA 实验目的 2.了解免疫酶斑点技术的用途。 1.了解免疫酶斑点技术的基本原理及方法；免疫斑点酶技术的原理硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜均具有很强的静电吸附力, 在中性条件下即可有效地吸附蛋白质等生物大分子。将免疫物质吸附于纤维素膜后，可利用纤维素膜作为固相进行抗原抗体反应。底物经酶反应后形成有色沉淀，使固相膜染色。包被未知抗原 NC 酶标抗体底物直接法Dot-ELISA 包被抗原 NC 待检抗体酶标抗体底物间接法Dot-ELISA 免疫酶斑点技术的特点 1）特异性强，假阳性较少； 2）敏感性高，NC膜对蛋白质的吸附性能优于聚苯乙烯，检出抗原的敏感性较常规ELISA法高6～8倍；3）试剂用量少，比ELISA法至少节约10倍；4）检测结果可长期保存，便于复查。 1. 小组为单位实验方法及注意事项 2. 膜片、抗原、洗涤液、吸水纸在实验台上 3. 酶标抗体放置在冰箱，使用前取出 4. 底物临用前配置 5. 震荡器全班一台, 调整好频率后不要乱动方法 (直接法) 1. 取硝酸纤维素膜片, 用笔做好标记方便加样; 2. 将稀释的抗原液2-5μl加于相应格内,室温自然干燥! 3. 将膜片放入封闭液中震荡封闭15分钟; 4. 用洗涤液震荡洗涤3次, 每次1分钟, 吸干; 5. 将膜片放入稀释好的酶标抗体液体中，震荡15分钟, 吸干; 6. 将膜片放入洗涤液中, 震荡涤洗3次×1分钟, 吸干; 7. 将膜片放入底物液中, 震荡15分钟左右观察。明显棕色斑点者为阳性实验结果 *