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甲砜霉素对肉鸡睾丸组织结构影响摘要：将152只4日龄雄性AA+肉鸡随机分为4组，每组38只，分别在饲料中添加0（对照组）、500（试验Ⅰ组）、1 000（试验Ⅱ组）、1 500 mg/kg（试验Ⅲ组）的甲砜霉素，自由采食，试验期2周，对睾丸进行病理形态学观察。2周后测量体重、睾丸重、睾丸脏器系数，并作睾丸石蜡切片测量曲精细管面积和观察甲砜霉素对肉鸡睾丸的病理组织学影响。结果表明，各试验组肉鸡体重和曲精细管面积以及试验Ⅱ、Ⅲ组试验鸡的睾丸重极显著低于对照组（P0.01），试验Ⅰ组试验鸡的睾丸重和睾丸脏器系数极显著大于对照组（P0.01）；各试验组肉鸡曲精细管出现不同程度的生精细胞数量减少，精原细胞和睾丸支持细胞发生水泡变性，甚至坏死，结缔组织增生。结果表明，用甲砜霉素添加量500 mg/kg及以上的饲料持续饲喂肉鸡，可对肉鸡的睾丸造成损伤，并且这种损伤在一定范围内存在显著的剂量效应关系。 关键词：肉鸡；甲砜霉素；睾丸；组织结构 中图分类号：S852.3 文献标识码：A 文章编号：0439-8114（2013）08-1880-03 甲砜霉素又名硫霉素，是氯霉素类的第二代广谱抗菌药，其对大肠杆菌、沙门氏菌、巴氏杆菌等都具有良好的抗菌作用[1-3]。因此，在中国广泛使用。但在实际生产中，养殖户违规滥用抗生素，不仅加剧了细菌对甲砜霉素的耐药性，而且加剧了其在动物机体内的残留量。国内外研究表明，甲砜霉素具有一定毒副作用。目前，关于甲砜霉素对试验动物小白鼠和大鼠危害的研究较多[4-6]，但对于经济食用动物危害的研究较少，仅见于鲤鱼[7]和肉鸡[8，9]，且其研究主要涉及甲砜霉素对血液生化指标、免疫器官的病理组织学，以及其在动物性产品中的残留及其检测等[10，11]方面。而关于甲砜霉素对肉鸡睾丸的影响鲜有报道。本试验通过研究不同水平的甲砜霉素对肉鸡睾丸组织结构的影响，旨在探讨甲砜霉素中毒的机理以及为临床合理利用甲砜霉素提供理论依据。 1 材料与方法 1.1 试剂与仪器 甲砜霉素为湖南湘药制药有限公司生产，纯度为99.7%，批号Leica-RM2235型切片机（德国莱卡公司）； Axiostar plus数码显微镜（德国Zeiss公司）。 1.2 试验动物分组 试验于2010年在河南科技学院动物科学学院实训中心进行。将152只4日龄雄性AA+肉鸡（购自内黄县牛召乡碾子头村种鸡场）称重后随机分为4组，每组38只，按甲砜霉素添加量分为0（对照组）、500（试验Ⅰ组）、1 000（试验Ⅱ组）、1 500 mg/kg （试验Ⅲ组）。自由采食与饮水，采用3层半重叠肉鸡一次育成笼舍饲，饲养过程严格遵循《AA+肉鸡饲养管理手册》。 1.3 检测指标 肉鸡饲养2周。每日观察并记录临床症状，对发病死亡鸡即时进行剖检。每周称重1次，记录各组平均体重。于受试验后2周从各组随机抽取6只鸡，分别称体重和采血后，放血致死，剖检并肉眼观察睾丸的一般病变后称重，根据脏器系数=脏器湿重/体重，计算其脏器系数。采取定期扑杀或采集死亡鸡的睾丸，用10%中性甲醛固定，石蜡包埋，切片及H.E常规染色，在普通光学显微镜下观察病理组织学变化。每张切片选取30个近圆形的曲精细管，由尼康NIS-Elements D图像处理软件测量曲精细管面积。 1.4 数据处理 所有数据采用SPSS 10.0统计软件统计。各组数据均以平均数±标准差表示，用单因子方差分析检验各组的差异显著性。 2 结果与分析 2.1 甲砜霉素对肉鸡性状及曲精细管面积的影响 由表1可以看出，不同剂量甲砜霉素均能抑制肉鸡体重增长，降低睾丸曲精细管面积；各试验组与对照组之间，试验Ⅰ组与试验Ⅱ、Ⅲ组之间差异极显著。500 mg/kg的甲砜霉素对睾丸重量和睾丸脏器系数有促进作用，显著大于对照组；1 000 mg/kg和1 500 mg/kg的甲砜霉素对睾丸重量和睾丸脏器系数具有一定抑制作用，睾丸重量极显著低于对照组，睾丸脏器系数与对照组之间差异不显著，组间差异不显著。 2.2 甲砜霉素对肉鸡睾丸形态结构的影响 由图1可知，对照组曲精细管形成完整的管腔，曲精细管上皮由支持细胞、精原细胞和少量初级精母细胞构成，上皮呈多层排列，部分细胞处于分裂状态，支持细胞数量较多（图1-A）。与对照组相比，试验Ⅲ组鸡睾丸的曲精小管管壁完整，但小管直径较小，曲精细管内细胞多呈单层排列，且排列松散，生殖细胞数量较少，多为支持细胞、精原细胞、极少量的初级精母细胞；大部分生殖细胞呈现空泡变性，部分支持细胞核浓缩深染。曲精细管间结缔组织大量增生（图1-B）。试验Ⅱ组睾丸的大部分曲精细管管壁完整，但管腔直径较小，生精细胞多为单层排列，数量极少，仅见