PM2.5不同成分致冠脉粥样硬化大鼠ACS可能机制.docVIP

PM2.5不同成分致冠脉粥样硬化大鼠ACS可能机制摘要:目的从炎症反应、氧化应激两方面来探讨PM2.5的水溶性及酸溶性成分致冠脉粥样硬化大鼠ACS的可能机制。方法48只Wistar大鼠随机分为两组，对照组和冠脉粥样硬化模型组，每组24只。提取PM2.5水溶性成分（WSC）及酸溶性成分（ASC）。将对照组和模型组再各自随机分为3组，正常对照组、WSC对照组、ASC对照组，以及模型对照组、WSC模型组、ASC模型组，每组8只。WSC组通过尾静脉注射的方式给予WSC（40 mg/kg）染毒；ASC组给予ASC（40 mg/kg）染毒。染毒24 h后处死大鼠，测定血清中丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、白细胞介素-6 （IL-6）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）含量及心肌中的NF-κB活性。结果WSC组TNF-α水平（2.83±0.97） ng/mL，高于空白组（2.53±0.76） ng/mL;心肌NF-κB的活化程度为（14.56±10.58）%，高于空白组（7.33±3.97）%。ASC组MDA水平（8.27±2.70） nmol/mL，高于空白组（7.24±0.66） nmol/mL；SOD水平（118.56±8.92）U/mL，低于空白组（130.38±5.69） U/mL；心肌NF-κB的活化程度（18.80±17.04）%，高于空白组（7.33±3.97）%。结论WSC具有升高TNF-α水平，激活心肌NF-κB的作用；ASC具有升高MDA、降低SOD水平，激活心肌NF-κB的作用。PM2.5致冠脉粥样硬化大鼠ACS发生的机制可能与其水溶性成分可加剧模型大鼠体内炎症反应，而酸溶性成分在加剧炎症反应的同时，还表现出氧化应激损伤相关。 关键词:PM2.5 PM2.5的水溶性成分 PM2.5的酸溶性成分 冠脉粥样硬化 氧化应激 炎症反应 中图分类号：R541.4文献标识码：A文章编号：1672-1349(2011)05-0566-03 大气颗粒物（particulate matter，PM）是对悬浮在大气中固体和液体颗粒物的总称，其中空气动力学直径≤2.5 μm的颗粒物称为PM2.5［1-3］。由于PM2.5粒径较小，可直接进入肺泡并沉积，并可通过肺泡进入血液，而且大部分有害元素和化合物都富集于PM2.5上，因而对人体健康造成的危害更大［1,4-6］，目前正逐渐引起学者的重视，受到普遍关注。大量流行病学研究发现，空气中PM2.5浓度增高与心肺疾病的超额发病率、死亡率相关［7-9］。美国国家环保局（EPA）进行的两项前瞻性队列研究表明，总死亡率及心肺疾病死亡率的上升与大气中PM2.5浓度增高相关［10,11］。还有研究表明［12］，急性心肌梗死（AMI）前2 h与24 h内大气颗粒物污染程度与AMI发病明显正相关；发病前2 h PM2.5每增加25 μg/m3，AMI发生危险增加48%，发病前24 h PM2.5每增加20 μg/m3，AMI发生危险增加69%，提示PM2.5对心血管系统具有潜在毒性。本实验在建立冠脉粥样硬化大鼠模型的基础上，提取PM2.5的水溶性及酸溶性成分，分别染毒模型及正常大鼠，通过对一些易损斑块标志物的检测，来探讨PM2.5不同成分致冠脉粥样硬化大鼠ASC的可能机制。 1材料与方法 1.1实验动物与试剂雄性Wistar大鼠，PM2.5样品来源于美国国家标准技术研究院，标号?2783，丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）检测试剂盒（南京建成生物工程研究所第一分所），肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、白细胞介素-6（IL-6）放射免疫试剂盒（解放军总医院科技开发中心放免所），NF-κB p65单克隆抗体（Santa Cruze公司）。 1.2动物模型的建造48只健康雄性Wistar大鼠，体重180 g~220 g，适应性喂养1周后，随机分为两组，对照组和冠状动脉粥样硬化模型组（模型组），每组24只。模型组饲喂高胆固醇饲料，并在饲养开始时，腹腔注射VD3 2 mL/kg（60 IU/kg）。对照组饲喂普通饲料，并在饲养开始时，腹腔注射生理盐水2 mL/kg。12周后模型建成。 1.3PM2.5不同成分的提取将400 mg PM2.5溶于10 mL双蒸水中，室温下搅拌溶解60 min，再超声震荡3次，离心，经三层滤纸过滤，所得滤液即为PM2.5水溶性成分（WSC），其终浓度为40 mg/mL，4 ℃贮存备用。将WSC提取过程中离心后所留沉淀物置于70 ℃干燥箱24 h，使其充分干燥，再将干燥物用10 mL浓度为1 mol/L的HCl溶解，所得滤液即为PM2.5酸溶性成分（ASC），其终浓度为40 mg/mL，4 ℃贮存备用。 1.4染毒及分组以尾静脉注射