普罗布考对乙醛刺激大鼠肝星状细胞作用和其分子机制得研究.pdfVIP

用，随着药物浓度和作用时间的增加，抑制率增高，具有一定的时间和浓度依赖 为16．45％、31．44％、75．12％和83．55％。 vs22．18士3．21 向S期转换，S期细胞与正常对照组比较有显著性差异(46．02-士3．04 期细胞比例下降，且呈剂量依赖性。普罗布考阻断HSC细胞I扫G0／G1期向S期转变， 从而抑制细胞DNA合成，抑制细胞分裂，使细胞周期进程减缓，阻止其发生增殖。 3、细胞免疫化学结果显示，与乙醛刺激组比较，普罗布考处理后，随着普罗 布考浓度的增加，cyclinDl蛋白表达强度呈逐渐减弱趋势，而p27bPl蛋白表达强 度呈逐渐增强趋势，有显著性差异；RT—PCR结果显示，与对照组比较，乙醛组cyclin D1 mRNA的表达明显增强；经普罗布考处理后，随着普罗布考浓度的增加，cyclin Dl表达呈逐渐减弱趋势，与对照组比较，乙醛Np27bPlmRNA的表达明显减弱；经 普罗布考处理后，随着普罗布考浓度的增加，p27bPl表达呈逐渐增强趋势，有显 著性差异。 4、免疫细胞化学结果显示，与乙醛刺激组比较，普罗布考处理后，随着普罗 布考浓度的增加，Q．SMA和FN蛋白表达强度呈逐渐减弱趋势。RT—PCR结果显示， 与对照组比较，乙醛组a．SMA和FNmRNA的表达明显增强；经普罗布考处理后， 随着普罗布考浓度的增加，伐．SMA和FNmRNA表达呈逐渐减弱趋势。 5、Western 白及mRNA的表达明显增强；经普罗布考干预后，随着普罗布考浓度的增加，CTGF 和PAl．1蛋白及mRNA的表达呈逐渐减弱趋势，各组间有显著差异。 化。 7、普罗布考干预24 h后明显抑制了乙醛诱导的HSC—T6细胞核p．catenin的表 达，同时抑匍]-TGSK．3B和ERKl／2的磷酸化。 结论 l、普罗布考呈浓度与时间依赖性抑制乙醛刺激的HSC．T6细胞的增殖， 且它抑制因乙醛活化而升高的细胞周期相关蛋白cyclinDl的表达，同时上调周期 蛋白依赖蛋白激酶抑制剂P27ki州的表达，调控细胞周期停滞于G0／G1期，从而 发挥抑制大鼠肝星状细胞增殖的作用。 2、普罗布考呈剂量依赖方式抑制乙醛诱导的肝星状细胞a—SMA和FNmRNA 及蛋白的表达。同时普罗布考还可以抑制乙醛诱导的HSC．T6细胞因子CTGF和 PAI．1rnRNA及蛋白的表达。 3、普罗布考可能通过阻断MAPK信号转导途径相关因子ERKl／2蛋白的磷 酸化，进而抑制HSC．T6细胞内Wnt／B．catenin信号通路，降低GSK．3B蛋白磷 酸化水平及下调B．catenin蛋白的表达，从而抑制外源性乙醛刺激的HSC．T6的增 殖和活化。 关键词 肝星状细胞；普罗布考；细胞增殖；细胞外基质；细胞周期；B．连环蛋白 4 ● 英文论著摘要 Effectsandmolecular mechanismof on atic probucolhep stellatecellstimulated byacetaldehyde Introduction Liverfibrosischaracterizedthe by excessiveaccumulationofextracellularmatrix the ofasustainedwound (ECM)represents to pathologicresponse healingresponse chronicliverdis