不同维甲类化合物对人胰腺癌细胞株JF-305生长抑制运用的比较.pdfVIP

中国医科大学 硕士学位论文 不同维甲类化合物对人胰腺癌细胞株JF-305生长抑制作用的比 较 姓名：张红军 申请学位级别：硕士 专业：外科学 指导教师：郭克建 中文摘要 刖 吾 在过去几十年中，胰腺癌发病率呈明显上升趋势，每10年约 增加15％，已成为}肖化系统中常见的恶性肿瘤之一。男性胰腺癌 占恶性肿瘤死亡原因的第四位。而目前的治疗方法所得到的效果 不尽人意。传统的细胞毒型抗肿瘤药物及放疗效果不佳，毒副作用 大，预后较差，5年生存率提高不到5％。不能切除的进展期病例预 后极差。为提高治愈率改善病人生活质量，需要新的治疗手段。 维甲类化合物包括维生素A及其具有类似结构或生物活性 的一大类天然及合成的衍生物。近年来发现某些恶性细胞如畸胎 瘤，鳞状细胞癌，神经母细胞瘤，白血病及黑色素瘤等可在体外被 其诱导分化为正常细胞或近似正常细胞。1988年中国科学家用全 反式维甲酸治疗人早幼粒自血病的成功及维甲酸受体的发现，为 胰腺癌开辟了分化治疗的途径。这样诱导分化及抑制细胞生长的 方向确立起来。80年代初在胰腺癌动物模型上应用维甲类化合物 试验表明：某些维甲类化合物具有化学预防作用。88年Jutley等 发现，维甲酸结合蛋白CRABP)存在于所有胰腺癌和胰腺炎病人 标本中，而正常组织中没有。胰腺癌标本中CRABP浓度明显大于 慢性胰腺炎标本。CRAtjP的存在指出维甲酸在胰腺功能中的重 现，维甲酸具有时问一剂量依赖性生长抑制作用。本研究拟观察人 胰腺癌细胞株JF一305对雅甲类化合物全反式维甲酸(ATRA)， 8757的敏感性。比较不同的维甲类化合物的生长抑制作用效能， 为进一步的研究打下基础， 材料和方法 人胰腺癌细胞株JF一305(由中国医科大学肿瘤研究所提供) 在100％湿度，5％CO。，37℃条件下培养于10％小牛血清的RP— MI一1640培养液中，单层传代培养。收集对数生长期细胞使之浓度 孔培养板。设定为四个实验用药组，一个阴性对照组和一个本底对 照组。用药组分别加入药物浓度为10_5mol／L的四种药物(9-cis— 阴性对照组加入100p1培养液。本底对照组加入2001培养液。设 每组8复孔。将96孔板在培养箱中培养24，48，72，96，120小时， 分别更换培养液后加入50txlMTT(1mg／m1)，继续于培养箱中培 DMSO震荡溶解30分钟。用酶标 养4小时后弃去上清，加150t*l 仪在波长492nm测吸光度A值，计算生长抑制率(CI一(阴性对 照组A值一用药组A值)／(阴性对照组A值一本底组A值)× 100％)。将用药组8复孔的光密度值取均值及标准差；用药组与阴 性对照组光密度值进行配对t检验，计算得出t值。 结 果 由于t3．50，故po．01。用药组与阴性对照组在统计学上 有显著差异。9-cis 达到峰高，分别为48．05％，52．68％及50．67％。120小时生长抑 制率有所下降。R040—8757抑制作用持续时间长，抑制率在120小 时达到峰高为62．85％。呈现出随时间延长，作用增强的趋势。 ·2· 讨 论 ’ 维甲酸主要与细胞分化，动物生长及全身功能翁保持有关，特 别与上糜组织分化及正常功能的保持有密切关系。维生素甲酸化 学上由环己烯，侧链及极性基团三部分组成。化学结构与生物活性 关系的研究表明，这三部分由不同基团取代时，可得到生物活性及 作用特点不同的化合物。综合文献可知，全反式维甲酸，13一顺式维 甲酸及