负压对供皮区创面再上皮化速度的影响.docVIP

　　负压对供皮区创面再上皮化速度的影响 ：许龙顺，乔骋，陈绍宗，李学拥 【摘要】 目的 观察负压对猪供皮区创面再上皮化速度的影响。方法 5头小猪，每头猪的背部各形成面积为5cm×10cm断层皮片供皮创面。实验组采用连续120mmHg(1mmHg=0.133kPa)负压 治疗 ，对照组用凡士林纱布换药。结果 负压治疗组创面再上皮化速度显著提高，治疗后4-6d创面即愈合，较对照组提前2-4d；创面炎症反应明显减轻；毛囊上皮、再生的基底以及腺上皮细胞增殖活跃，S期及G2+M期细胞比例增多(Plt;0.01)；细胞核增殖抗原表达显著增强。结论 负压可以显著提高供皮区创面再上皮化速度。 【关键词】 负压；创面愈合；再上皮化 　　ABSTRACT: Objective To test the effect of negative pressure on the rate of skin donor site reepithelialization in pig model. Methods Five pigs the back of each animal. Half of the donor sites mHg negative pressure as the experimental group for 10 days and half ent, 2 to 4 days earlier than the control group. The level of inflammatory reaction occurring in , regenerative basal cells and glandular epithelium on day 4 and 8 after negative pressure treatment. Conclusion Negative pressure could significantly increase the rate of skin donor site reepithelialization 　　KEY EM 5mL，轻轻吹打后同法离心2次，去除小碎片。弃上清，加入PBS 1mL，轻轻吹打,调整细胞数至(1-2)×106。将细胞悬液加入2mL 4℃酒精中固定，封口，4℃保存。固定的细胞悬液用PBS离心洗涤2次，调整细胞数至1×106，加入PI染液1mL，4℃冰箱避光染色30min。流式细胞仪测定分析细胞周期。 　　1.5.3 免疫组化SABC法检测细胞核增殖抗原(PA) 参照Boster公司产品使用说明操作，15μm石蜡切片，二甲苯脱腊，甲醇30mL/L过氧化氢，30min，PBS清洗5min×3次，50mL/L兔抗血清30min，PA单抗(1∶200)室温过夜，PBS清洗5min×3次，羊抗兔血清(1∶200)，室温30min，SABC室温下30min。PBS清洗5min×3次，DAB显色，脱水、透明，封片，观察。以0.01mol/L的PBS代替一抗作阴性对照。 　　结果判断：400倍光镜下观察记录5个视野内平均阳性细胞数。阳性细胞数低于5个计为(-)，5-10个计为(+)，10个以上计为()，大于半数计为()。 　　1.6 统计学处理 采用SPSS11.0软件，组织学及免疫组化结果按等级资料分析；细胞周期测定值作成组t检验，方差不齐时作t检验，Plt;0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　所有动物均能适应负压治疗，较安静，未见明显躁动不安，无创面感染发生。供皮区创面出血点较小且致密，皮片的皮下面略暗，组织学检查证实所有动物供皮区创面深度一致，相当于中厚皮片供区创面。 　　2.1 大体观察结果 术后2d，对照组创面有血性渗出及血痂，无上皮再生表现；实验组创面清洁，表面无明显血痂及渗出，无明显上皮生长。术后第4天，对照组创面仍有大量血痂附着，未见明显上皮再生现象；实验组创面清洁，表面有成片状再生的上皮组织，绝大部分皮岛融合成片，创面缩小。术后第6天，对照组创面有皮岛生长，创面缩小，但创面表面仍有较多血痂附着；实验组创面完全愈合。术后第8天，对照组创面完全愈合。 　　2.2 组织学观察结果 术后第2天，镜下可见对照组创面有厚层分泌物黏附，创面组织及创面分泌物中有大量炎症细胞浸润，无上皮再生现象(图2B)；实验组创面表面清洁，组织内无明显炎症细胞浸润，部分毛囊上皮细胞胞体明显增大，尤以靠近创面侧为明显，未见明显再生的上皮细胞(图2A)。术后第4天，对照组创面有大量炎性分泌物黏附，组织内及分泌物中仍有大量炎症细胞浸润，无上皮再生(图3B)；实验组创面表面清洁，组织内炎症细胞浸润较轻，毛囊上皮增生、向创面表面移行，上皮细胞再生明显，再生的上皮细胞有2-