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HPLC法测定乳癖消片中丹皮酚含量(辽宁省瓦房店轴承医院，辽宁瓦房店116300) 摘要：目的：建立乳癖消片中丹皮酚的含量测定方法。方法：Zorbax eclips XDB C18(150mm×4.6mm，5μm)不锈钢色谱柱。流动相：甲醇-水(42:58)，检测波长：274nm，流速：1.0mL/min。结果：丹皮酚在0.0422μg～0.211μg范围内呈良好线性关系，r=0.9996，平均加样回收率为96.4％；RSD为1.8％。结论：所建立的方法准确可靠适用于乳癖消片的质量控制。 关键词：乳癖消片；丹皮酚；HPLC 中图分类号：R285.5　文献标识码：A 文章编号：1673-7717(2007)05－1062-02 乳癖消片由中国药典一部收载，由鹿角、牡丹皮等组成，软坚散结，活血消痈，清热解毒。用于乳癖结快，乳痈初起；乳腺囊性增生病及乳腺炎前期等症。但标准中并无含量测定项。为控制产品质量，本文经研究采用了HPLC法，建立了对制剂中丹皮酚的含量测定方法。 1仪器与试药 仪器：岛津-LC-10A高效液相色谱仪(紫外检测器，浙大N2000工作站)；AS3120A超声波清洗器(天津)；AE240十万分之一电子天平(瑞士)，AK2140万分之一电子天平(上海奥豪斯公司)。 试剂、试药：丹皮酚对照品(0708-9704，供含量测定用)，购于中国药品生物制品检定所。 流动相用水为超纯水，所用醇均为色谱纯，其余试剂均为分析纯。乳癖消片为市售。 2色谱条件与系统适用性实验 2.1检测波长的选择　经查阅文献，丹皮酚对照品溶液在274nm波长处有最大吸收，中国药典2005年版一部牡丹皮含量测定选用274nm作为检测波长，因此实验选择274nm作为检测波长。 2.2流动相的选择　经查阅文献，丹皮酚多用甲醇-水系统进行色谱分离。实验以甲醇-水(50:50)、甲醇-水(42:58)为流动相；以Zorbax eclipse XDB C18(150mm×4.6mm)为分析柱；流速：1mL/min；柱温：30℃。结果丹皮酚可达到基线分离，峰型对称，理论板数按丹皮酚峰计算均大于5000；缺牡丹皮阴性对照无干扰。实验选择甲醇一水(42:58)为流动相。 2.3色谱柱的考察　实验曾选用Diamonsil(钻石)C18(150mm×4.6mm，5um)、AICHROMTM Reliasil C18(150mm×4.6mm，5um)、Zorbax eclipse XDB C18(150mm×4.6mm)3个品牌的色谱柱；以甲醇-水(42:58)为流动相；检测波长：274nm；对消痔片中的牡丹皮进行含量测定，均得到丹皮酚对照品基线分离的对称色谱峰，分离度均大于2，理论塔板数按丹皮酚峰计算大于5000。方法学考察以Zorbaxeclipse XDB C18(150mm×4.6mm)为分析柱。 色谱柱：Zorbax eclipse XDB C18(150mm×4.6mm)色谱柱；流动相：甲醇-水(42:58)；流速：1.0mL/min；柱温：30℃；检测波长：274nm；理论板数：理论板数以丹皮酚峰计算应不低于5000。进样量10μL。 3方法与结果 3.1线性关系考察　精密称取丹皮酚对照品适量，以甲醇溶解，制成浓度为21.1μg/mL的对照品溶液。精密吸取2.0,4.0、6.0、8.0、10.0μL注入液相色谱仪中，绘制标准曲线。以进样量为横坐标，以色谱峰面积为纵坐标，经回归处理，得到丹皮酚回归方程，为Y=7828.1663X+22.5305，相关系数为r=0.9996。结果表明，丹皮酚进样量在0.0422μg-0.211μg范围内线性关系良好。 3.2精密度实验　(1)精密称取样品1份，按样品溶液制备方法制备，重复进样5次，丹皮酚峰面积积分值的相对标准偏差分别为0.8％。(2)重复性与稳定性试验取同一批号的本品5份，分别按样品溶液制备方法制备，按上述色谱条件测定，结果RSD为1.5％，表明本法重复性良好。取1份样品溶液，在0、2、4、12、24h各测定1次，结果表明，本溶液在24h内稳定，RSD为1.4％(n=5)。 3.3加样回收率实验 精密吸取已知丹皮酚含量为0.1405mg/g的乳癖消片5份，各1.0g，分别置具塞锥形瓶中，分别精密加入丹皮酚对照品溶液(0.0211mg/mL)各5mL，按供试品溶液制备方法操作，即得加样回收溶液，精密吸取加样回收溶液10μL，注入液相色谱仪中，测定，得平均回收率为96.4％；RSD为1.8％(n=5)。说明本法回收率好，方法可行。 3.4阴性对照试验 取不含牡丹皮药材的阴性空白样品。按供试品溶液制备方法，制得阴性对照