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bFGF对前脂肪细胞增殖及分化作用[摘要]目的：探讨ｂFGF对体外培养前脂肪细胞增殖和分化活性的影响。方法：无菌条件下抽吸的脂肪组织进行前脂肪细胞的原代培养，加入生长因子ｂFGF 10ng/ml，用 MTT 法观察人前脂肪细胞生长状态，测定前脂肪细胞合成甘油三酯的总量。 结果：bFGF有明显的促增殖作用,与对照组比较第1、2天差异不明显，随时间的推移，第6～7天到达高峰；到分化6天和9天时,甘油三酯总量明显升高,与对照组相比差异均有显著性(P0.05)。结论：重组人ｂFGF可促进前脂肪细胞的增殖和分化。 [关键词]前脂肪细胞；ｂFGF；增殖和分化 [中图分类号]Q813.1[文献标识码]A[文章编号]1008-6455（2007）10-1350-03 Effects of bFGF onpreadipocytes on proliferation and differation in vitro WU Ju-long,LI Shi-rong (Department of Plastic Surgery,Southwestern Hospital, the Third Military Medical University,Chongqing 400038, China) Abstract: ObjectiveToinvestigate theeffects of bFGF onpreadipocytes(Pra) on proliferation and differation in vitro.MethodPreadipocytes were isolated out of fragmentsof freshly obtained human subcutaneous adipose tissue ofadults and cultured. The second passage cells with the density of 104 /cm2 were cultured in DMEM containing 10ng/ml bFGF ( the control only in DMEM),counting the number of the cells with MTT, making the growth curve of the cells and examining the TG masssynthesized in 3rd , 6th and 9th.ResultsbFGF can improve the proliferation of preadipocytes and bFGFcan increase the synthesis of TG of preadipocytes.ConclusionbFGF can improve the proliferation and stimulate differentiation of PraIn vitro. Key words: preadipocytes; bFGF; proliferation and differation 前脂肪细胞是一类具有增殖和向脂肪细胞分化能力的特异化的前体细胞。它的存在和作用持续人的一生，与脂肪移植成活率密切相关，可作为治疗许多软组织缺陷的有益填充物。自体前脂肪细胞， 在体外单层培养时表现出有限的生长特性， 经过一定的倍增即逐渐失去增殖能力而停止分裂[1]，前脂肪细胞细胞来源不足至今仍是制约其临床应用的一道难以逾越的瓶颈。生长因子参与调节前脂肪细胞增殖、分化及代谢功能［2］， 因此有望通过应用合理的刺激方式， 达到细胞有效扩增。本实验研究碱性成纤维细胞因子(ｂFGF)对体外培养前脂肪细胞增殖和分化活性的影响，为临床应用打下基础。 1材料和方法 1.1 主要试剂： DMEM/F12 培养基和胎牛血清购自HYCLONE 公司，重组人ｂFGF购自美国ReproTech公司，甘油三酯试剂盒购自北京中山生物技术有限公司。 1.2 试剂的配制 1.2.1基础培养基的配制(1000ml)：DMEM/F12 干粉一袋加去离子水850ml,待全部溶解后加入 NaHCO 2.8g，10万U/ml 青链霉素溶液1ml, 定容至900ml，添加灭活后的小牛血清100ml，使得终浓度为10％，用0.1N的HCL和 NaOH调节pH到7.1。0.22μm 滤膜过滤除菌分装，-20℃保存备用。 1.2.2分化培养基配制(1000ml)：DMEM/F12干粉一袋加去离子水 850ml,待全部溶解后加入 NaHCO3 2.8g，添加 50ml 灭活的小牛血清、添加胰岛素(0.5μM)、