agilent 1200-6320 ion trap xct液相色谱-质谱联用仪操作规程.docVIP

Agilent 1200/6320 Ion Trap XCT液相色谱/质谱联用仪操作规程1仪器组成及开机1.1 仪器组成 Agilent 1200系列LC/6320 Ion Trap XCT液相色谱离子阱质谱联用仪由Agilent 1200高效液相色谱系统、质谱和工作站组成。液相部分由真空脱气机、四元泵、自动进样器、柱温箱和二极管阵列检测器组成；质谱为离子阱多级质谱仪，带APIESI源。各部分的操作及数据处理均由工作站计算机控制完成，其操作系统为Windows XP，工作站软件版本为ChemStation Rev.b.01.03【204】。1.2 开机打开液氮罐的出口阀门，使出口压力达到0.55~0.69 MPa(80~100 psi)，检查氦气出口压力为0.41~0.55 MPa(60~80 psi)。在确保各类气体压力参数符合规定的情况下，接通电源，先开启位于质谱仪左侧门内下方的主电源开关，再开启质谱仪正面下方的副电源开关，开启Agilent 1200高效液相色谱系统各部件的电源开关，启动计算机，进人Windows XP界面后，双击Instrument 1 Online图标，约1 min后，进入Chemstation化学工作站，Ion Trap Control和Data Analysis界面也随之打开。2 液质方法的建立2.1 液相色谱条件的建立 液相色谱条件的建立可以通过以下几种方法实现2.1.1 直接设定用鼠标左键单击操作界面的各个图标，选择【Setup．．．】，进行进样体积、流速、流动相比例、分析停止时间、柱温、检测波长等参数的设定，键设定值后，单击【OK】，即完成。2.1.2 调用已设置好的文件 在命令栏【Method下，选择【Load Method．．．】，或直接单击快捷操作的Load Method．．．】，选定文件名，单击OK】，工作站即调用所选文件设定的参数。如欲进行修改，则可参照“2.1.1”项，进行各工作参数的设置；也可在命令栏【Method】下，选择【Edit Entire Method．．．】，根据工作站按顺序出现的一系列参数设置页面，进行工作参数的修改，单击OK】，即完成。2.1.3 编辑新文件 先在命令栏Method】下，选择New Method】,可参照。“2.1.1”项，进行各工作参数的设置；也可在命令栏【Method】下，选择【Edit Entire Method．．．】，根据工作站按顺序出现的一系列参数设置页面，键设定值，完成后，在命令栏【Method 】下，选择【Save Method】，给新文件命名，单击【OK】，即完成。2.2 质谱条件的建立 鼠标左键单击质谱图标MS(n)的【Settings】或单击状态栏的【MSD Trap Control】，均可方便地切换到质谱界面。2.2.1 Mode项下各参数的设置 选中【Save Spectra】，根据实际需要选择【Include Profile Spectral】项下4种方式中的任一种。【Scan Range】项的选择是根据待测化合物的分子量进行考虑的；相应地选择【Scan Resolution】项下的【Normal 1】、【Enhanced】或【Maximum】模式。【Divert ValVe】一般设在【To Source】状态，使待测样品进入离子源进行质谱分析，但也可根据需要，选择【To Waste】，以减少离子源和离子阱的污染。2.2.2 Tune项下各参数的设置 选【Smart】，如从注射泵以5μlmin的速度直接进样，【Nebulizer】设为5~15 psi，【Dry Gas】设为5 L/min，【Dry Temp 】设为325~350℃；如从液相以100~500 μl/min的速度进样，【Nebulizer】设为20 ~ 40 psi，【Dry Gas】设为8~10 L/min，【Dry Temp】设为325~350 ℃。 在 【Target Mass】中输入需要测定的离子的质量(m/z)；【Compound Stability】和【Trap Drive Level】一般均设为100％，但如果待测化合物非常不稳定，在离子传输过程中即产生大量的碎片离子，可根据实际情况，在10％~100％之间进行设定。2.2.3 MS(n)项下各参数的设置 选中【Auto MS(n)】，根据具体情况选择需要做几级质谱，在【Auto MS】中输入2~5以内的数字，并画“√”选中。【No．of Precursor Ions】一般设为1，但如果待测化合物为多肽或蛋白质，也可设为其他数值。根据本底情况，在【Threshold Abs】后面的空格内输入适当的阈值。画“√”选中【Prec．Operation】项下的【SP