熊果苷对体外培养的人黑素细胞的作用.docVIP

熊果苷对体外培养的人黑素细胞的作用 丁国斌，陈 璧，汤朝武【关键词】? 熊果苷 　　关键词: 熊果苷;黑素细胞;一元酚单氧酶;黑素类/生物合成 　　摘 要:目的? 研究熊果苷对体外培养的正常人表皮黑素细胞的作用效应. 方法? 利用碱性成纤维细胞生长因子为主要有丝分裂原建立正常人表皮黑素细胞培养系，MTT法测定熊果苷对黑素细胞活力的影响，以左旋多巴为底物测定酪氨酸酶活 性，比色法测定黑素含量，并与曲酸及维生素C磷酸酯的结果比较. 结果? 熊果苷对体外培养的正常人黑素细胞酪氨酸酶活性呈浓度依赖性抑制，可显著减少黑素生成量，对黑素细胞活力影响很小. 结论? 熊果苷对体外培养的人黑素细胞的酪氨酸酶活性及黑素生成有显著抑制作用，且细胞毒性很低. Effects of arbutin on cultured human melanocytes???? 　　DING Guo-Bin，CHEN Bi，TANG Chao-Wu???? 　　Department of Burn Surgery，Xijing Hospital，Fourth Military Medical University，Xian710033，China????? 　　Keywords:arbutin;melanocytes;monophenol monooxyge-nase;melanins/biosynthesis???? 　 　Abstract:AIM To study the effects of arbutin on cultured human melanocytes.METHODS Basic fibroblast growth factor（bFGF）was employed to establish the culture of nor-mal human melanocytes.After arbutin was added into cul-tured human melanocytes，the cell viability，tyrosinase activi-ty and melanin content were measured by MTT assay，uti-lization of L-Dopa as the substrate，and colorimetric analy-sis，respectively.Furthermore，the effects of arbutin on the melanocytes were compared with that of kojic acid and Ascor-bic acid2-phosphate.RESULTS Arbutin showed a concen-tration-dependent reduction in tyrosinase activity of human melanocyte.Melanin content was reduced significantly by ar-butin，which has little influence on melanocytes viability.CONCLUSION Arbutin can significantly inhibit the tyrosi-nase activity and melanogenesis of cultured human melanocytes with low cytotoxicity.? 　　0 引言???? 　　皮肤 色素沉着常见于黄褐斑、老年斑及Ⅱ度烧伤创面愈合后，对外观影响较大.黑素细胞合成黑素是在其特征性细胞器―黑素小体内进行的，酪氨酸酶是黑素生成的主要 限速酶，催化酪氨酸羟化为多巴并进而形成多巴醌的反应［1］ .酪氨酸酶抑制剂熊果苷是近来研究较多的一种脱色素药物，由于实验使用的细胞系及培养方法不同，各家报道的结果出入很大［1-5］ .我们利用体外培养的正常人表皮黑素细胞，研究了熊果苷对黑素细胞的增殖、酪氨酸酶活性及黑素生成量的影响，并与曲酸及维生素C磷酸酯比较，为进一步的临 床应用提供参考.???? 　　1 材料和方法???? 　　1.1 材料? 　　熊果苷（arbutin），曲酸（kojic acid），维生素C磷酸酯（AP，L-ascorbic acid2-phosphate）及左旋多巴（L-Dopa）购自美国Sigma公司;RPMI1640培养基及霍乱毒素（cholera toxin）购自美国Gibco公司;Dispase酶购自日本三光纯药株式会社;（methyl thiazdyl tetrazolium，MTT），Triton X-100，转铁