人参皂苷rg3诱导乳腺癌细胞系mcf-7凋亡的分子机制研究.docVIP

人参Rg3诱导乳腺癌细胞系MCF-7凋亡的分子机制研究 [摘要] ：人参皂甙Rg3[ 20(R)-Ginsenoside Rg3]是从红参中提取的微量中药单体。近年研究表明人参皂甙Rg3 尚具有抑制肿瘤细胞的增殖、抗肿瘤细胞浸润和转移等作用。肿瘤的发生和发展是一个极其复杂的过程，有多种转移相关的蛋白因子参与，并涉及多种转移途径和分子机制。人参皂甙Rg3 抗肿瘤机制的研究为目前中药抗肿瘤研究热点之一。本研究的目的在于探讨Rg3 抑制乳腺癌细胞的作用及其诱导凋亡的机制。研究表明人参皂甙Rg3可通过上调FAS表达诱导乳腺癌MCF一7细胞的凋亡。 [关键词] ：人参皂甙Rg3；肿瘤；凋亡；MCF-7细胞 [Abstract] Ginsenoside Rg3 is a kind of effective chemical trace component extracted from the red panix. Many studies demonstrated that ginsenoside Rg3 might block angiogenesis and inhibit tumor growth and metastasis. The mechanism of ginsenoside Rg3 in anti-tumor is now one of hot point of Chinese traditional medicine researches. The purpose of this study is to explore the effect of Rg3 on induction apopotosis of human MCF-7 breast cancer cell line. [Key words] Ginsenoside Rg3; tumor; apoptosis; MCF-7 cell line 前言 乳腺癌是妇女常见的恶性肿瘤之一，现在全世界每年发病人数已达130万例，我国乳腺癌发病率明显逐年增高，在部分大城市已占妇女恶性肿瘤的首位，乳腺癌每年死亡人数约占发病人数的三分之一，严重危险广大妇女的生命健康，目前乳腺癌尚无根治措施。乳腺癌主要治疗方法包括：新辅助化疗、手术切除、辅助化疗、内分泌治疗、靶向治疗，生物治疗等的综合治疗[1]。由于上诉治疗方法不同程度存在心、肝、肾损伤、胃肠道不良反应、骨髓抑制、严重的过敏反应并易产生抗药性。 目前，来源于动、植物的天然化合物成为研究抗癌药物的主要方向，而传统的中药越来越受到大家的青睐。人参皂甙Rg3 是从红参中微量提取的中药单体。日本著名药学家北川勋(1982) 首先鉴定了其分子结构，分子式为C42H72O13；分子量为784.30。国内外学者对Rg3 的抗癌进行了研究。实验证实Rg3 能抑制动物体内移植肿瘤的生长、浸润和转移，包括肺癌、胃癌、黑色素瘤、胰腺癌、乳腺癌、S-180 肉瘤和肝癌等。但Rg3 对乳腺癌细胞MCF-7 的影响未见报道。然而，其确切的分子机制还不清楚。由于乳腺癌的发病率逐年提高，故研究Rg3 对乳腺癌细胞MCF-7生长抑制作用及其分子机制是刻不容缓的。 1 抗MCF-7细胞活性机制研究 1.1 MTT法检测人参皂甙Rg3对MCF-7细胞的抑制作用及其半数抑制浓度实验结果显示：加入MTT后细胞内可见紫蓝色结晶物，加入二甲基亚砜(DMS0)后细胞中的紫蓝色结晶物溶解。不同浓度人参皂甙Rg3(0、37.5、75、150、300、600μg／m1)作用于MCF-7乳腺癌细胞48小时后，人参皂甙Rg3对MCF-7乳腺癌细胞有明显的抑制作用，并且抑制率随着人参皂甙R93浓度的升高而增大。SPSSl3.0软件SNK-q检验各浓度之间平均抑制率之间差异有统计学意义，并且得出其半数抑制浓度IC50=200±0.712μg／m1实验结果见表-l、图-1。 图1 MTT法测定Rg3对MCF-7细胞生长抑制作用 1.2 PI法测细胞周期 PI法检测细胞周期结果显示：与对照纽相比，人参皂甙Rg3组(300μg／m1)作用于MCF-7乳腺癌细胞48小时后，S期细胞比对照组增加了17. l4％；G2-M期细胞比对照组增加了7.76％，(P0.05．差异具有统计学意义)。实验结果表明20S-人参皂甙Rg3可以调节MCF-7乳腺癌细胞周期，抑制MCF-7细胞DNA的合成及抑制MCF-7细胞的有丝分裂，使其阻滞于S期和G2-M期。实验结果见表2。 1.3 AnnexinV/PI法检测MCF-7乳腺癌细胞凋亡 AnnexinV/PI法检测MCF-7乳腺癌细胞凋亡结果显示：与对照相比，人参皂甙