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引物(primer)-昆明医科大学.ppt
许冰莹, Tel:0871-;第二节 聚合酶链式反应 ;教学内容和目的要求:*掌握PC;聚合酶链式反应 polymer;What is PCR ?PC;Kary B MullisPC;*一.PCR原理( PCR p;The PCR princip;Denaturation (变;The ReactionThe;DNA Denaturati;DNA Annealing(D;DNA Extension(D;DNA template95℃;95℃50-60℃Antise;PCR的基本原理PCR反应条件;PCR的基本原理PCR反应条件;PCR的基本原理PCR反应条件;PCR的基本原理PCR反应条件;1234522557294时间;预变性(93-95?C,2-5;*二.PCR反应体系Taq D;标准的PCR反应体系( 100;What’s in the T;1.Taq DNA聚合酶(Ta;1.Taq DNA聚合酶(Ta;人工合成的寡核苷酸序列,与靶D;例如IL-3 :5‘GCTCC;引物设计原则:(1)序列应位于;3.模 板(template);dNTP浓度取决于扩增片段的长;5. Mg2+ Mg2+;三.热循环参数对PCR的影响变;1.变性温度与时间一般93℃~;2.退火(复性)温度与时间取决;延伸温度:一般在70~75℃之;4.循环次数 主要取决于模版;5.PCR技术的特点High ;电泳分??PCR扩增DNA提取P
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