金属钴树状高分子与DNA相互作用的光谱法研究.pdfVIP

第29卷，第3期 光谱学与光谱分析 200 and 9年3月 Spectral March，2009 Spectroscopy Analysis 金属钴树状高分子与DNA相互作用的光谱法研究 李金焕，艾仕云’，时伟杰，殷焕顺，杜红霞 山东农业大学化学与材料科学学院，山东泰安271018 摘要通过氯化钴、乙二醛和第五代树状高分子反应合成了金属钻树状高分子配合物。并以亚甲基蓝为 荧光探针，通过紫外一可见光谱、荧光光谱和同步荧光方法研究了金属钴树状高分子配合物与鲱鱼精DNA (hsDNA)的相互作用。结果显示，此配合物与hsDNA作用时，其紫外吸收产生明显增色效应。荧光强度增 强。NaCl不同程度抑制金属钴树状高分子与hsDNA的结合。配合物也以竞争方式抑制亚甲基蓝与hsDNA 作用，而亚甲基蓝可以插入金属钴树状高分子配合物的内部。这些结果证明，配合物主要通过与hsDNA链 上带负电荷的磷酸基静电相吸形式结合而堆积在双螺旋hsDNA分子表面，减弱了结合位点附近亚甲基蓝分 子与hsDNA的静电作用，而钠离子中和了hsDNA上磷酸基团上的负电荷，削弱了该配合物与hsDNA的静 电结合。 关键词金属钴树状高分子；DNA；相互作用；光谱法 中图分类号：0641．4。0657．3文献标识码：A 治疗药物的研究提供了依据。 引 言 1实验部分 近年来，基因治疗是公认的高效、经济的疾病治疗途 径。DNA和金属配合物及药物分子的相互作用研究Ir“，不仅1．1主要试剂与仪器 能探索开发新的核酸探针，而且有利于从分子水平上了解药 腓鱼精DNA(生化试剂，美国Sigma公司，于4℃保存 物的作用机制，为设计临床上更为有效的药物提供理论指 备用)；亚甲基蓝(生物染料剂，天津市天新精细化工开发中 导。席夫碱及其金属配合物由于与DNA的作用而具有良好 心)；5．0G 的抗肿瘤、抗病毒活性，是一类较好的抗癌药物，同时，席 次蒸馏水，其他试剂均为分析纯。PHS-3CT型精密pH计 夫碱的配合物在生理和药理上也具有特殊的活性雎_]，对其 (I-海大中分析仪器厂)；VarioEI。111型元素分析仪(德国E卜 与DNA作用的研究也正日益受到人们的重视[4-73。另外，在 研究配合物与DNA的相互作用时，一般多采用溴化乙啶 5301PC荧光分光光度计(日本岛津)。 (EB)作荧光探针的荧光法。此法虽然较为灵敏，但荧光探针1．2金属钴树状高分子的合成与表征 EB具有强致癌性并且具有一定的局限性[8·…，而亚甲基蓝 15rnL氯化钴溶液(3．8tool·mI。1)加入7mL乙二醛 是一类光敏性药物分子，能与DNA以嵌插和静电方式结合， 水溶液(14％)，60℃氮气保护下搅拌反应2h。然后在1h内 常作为生物染料和光谱探针Ll…。树状高分子具有精确纳米 滴加5 反应74 构造，表面高官能团密度，分子大小、形状可控的三维结构， h，溶液慢慢由亮紫色变成黑红色。将所得溶液采用 mL的去离子水、4×500 良好的单分散性，高对称性和生物相容性等特性使其在医学 8000—14400透析袋依次用6×500 和生物学领域得到广阔的发展¨“地J。本文合成了一种既具 mL的0．1tool·I。一1NaCl、6×500mI。的去离子水透析。透 有树状高分子特性又具有席夫碱配合物性质的金属钴树状高 析液用硝酸银检验至无氯离子存在。冷冻、干燥得到棕色絮 分子(记为PAMAM-Co)，并选用亚甲基蓝(MB)为荧光探针状目标产物，其结构式见图1。