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蛋白质含量测定(考马斯亮蓝)
实验五 蛋白质含量的测定(考马斯亮蓝法) ;一、目的要求 1、学习和掌握蛋白质含量测定的原理 2、掌握考马斯亮蓝染色法测定蛋白质浓度的操作技术 ;二、实验原理;Coomassie Dye-Based 蛋白质定量; 三、试剂及器材 ;四、 操作方法 1、标准曲线制作 取7支试管,按下表操作。 试管编号 1 2 3 4 5 6 7 8(样品) 标准蛋白溶液(mL) 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.6 0.8 1ml 0.9% NaCl(mL) 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 0.2 0.2 样品 标准蛋白含量(?g) 0 10 20 30 40 60 80 考马斯亮蓝试剂(mL) 4.0 mL 颠倒摇匀,静置5min,以 1 号试管为空白对照,在595nm处比色 A595(OD595) 0 2、样品的测定 取一EP管,加入样品液1.0ml+4.0ml考马斯亮蓝液4.0ml,同上操作,测A595;五、 结果及分析 ;六、 注意事项;七、 思考题;
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