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2017-08-06 发布于浙江
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DH10B菌株高效电转化条件探究

23 卷 2 期生　物　工　程　学　报 Vol. 23 　No. 2 2007 年 3 月 Chinese Journal of Biotechnology March 　2007 D H10B 菌株高效电转化条件探究　 The Study of Optimal Conditions of Electroporation in Escherichia coli D H10B Strain 1 ,3 2 1 ,2 1 2 1 张　洋 ,王志强 ,刘　斌 ,张晓军 ,姜　枫 ,相建海 1 ,3 2 1 ,2 1 2 ZHANG Yang , WANG ZhiQiang , LIU Bin , ZHANG XiaoJun , J IANG Feng and XIANGJianHai1 1 中国科学院海洋研究所 ,青岛　266071 2 北京华大基因组研究中心 ,北京　101300 3 中国科学院研究生院 ,北京　100039 1 Institute of Oceanology , Chinese Academy of Sciences , Qingdao 266071 , China 2 Beijing Genomics Institute , Beijing 101300 , China 3 Graduate School of Chinese Academy of Sciences , Beijing 100039 , China 摘　要　以pUC19 、pECBAC1 、pCLD04541 DNA 以及 3 个不同大小的BAC DNA 为材料 ,研究了 E . coli DH10B 菌株在 5 个不同脉冲电场下的转化效率。研究发现 , 随着 DNA 片段大小的增加 ,最高转化效率和最适场强迅速减小。利用 DH10B 细胞转化 pUC19 DNA 的最适场强是 21 kVcm ,而 190 kb BAC DNA 仅为 13 kVcm ;在最适场强下 ,40 kb BAC DNA 的转化效率约是 190 kb BAC DNA 的 50 倍。通过大量数据绘制了不同因素影响下转化效率的变化曲线 ,优化了 E . coli DH10B 菌株电转化条件 ,为质粒的重组转化以及大片段基因组文库的构建奠定了基础。关键词　感受态细胞 , 电转化 , 转化效率 , 脉冲电场强度 , 质粒 DNA ( ) 中图分类号　Q9399 　　文献标识码　A 　　文章编号 2007 Abstract 　In order to optimize the conditions of construction BAC library , the transformation efficiency of E . coli DH10B was ( 10 μ