1 第 1 页 共 5页 试验报告 编号：农业微生物研究中心[2010-01-12], 共5 .DOCVIP

编号：农业微生物研究中心[2010-01-12], 共 页 承担单位：福建省农科院课题编号： 课题名称：课题负责： 子课题名： 子课题号： 子课题人： 子项目名：试验项目：试验人员：试验负责：报告日期：20计数月份：20年月 研究资格系数 (0.5-1.0) 实验设计系数 （0.9-1.0） 报告得分 总分 实验设计 实验记载 实验分析 实验简报 实验文章 1-20% 21-40% 41-60% 61-80% 81-100% 1%-5% 设计，实施实验，记载，分析清晰，结论清晰文献完整，发表水平 福建省农业科学院电话: 0591 传真: 0591 本试验的目的在于检测生防菌JK-2 2试验方法 2.1实验仪器与材料 电子天平（）；恒温摇床（）；Brevibacillus brevis JK-2和大肠杆菌Escherichia coli。大肠杆菌K88菌株为本实验室购买。 培养基 JK-2液体培养基配方为：淀粉1.0%、牛肉膏0.5%、蛋白胨0.3%、蔗糖1.0%、酵母0.5%、 氯化钙05%，初始PH=7.0。 大肠杆菌底层培养基（NA）：蛋白胨g，g，10g，琼脂15g，水1000ml，pH 7.0。大肠杆菌上层培养基：琼脂为0.7%的。2.2 实验方法 2.2.1 JK-2的接种 分别将250μl、500μl、1ml、1.5ml、2ml、2.5ml的JK-2种子培养液接种到装有50 ml培养基的250 ml的三角瓶中，形成接种量为0.5%、1%、2%、3%、4%、5%的发酵液、并置于30℃、180rpm的恒温摇床中培养2.2.2 用打孔法做JK-2对大肠杆菌K88抑菌实验 将将培养的发酵液离心（000pm，20min，取上清液，用细菌过滤器（孔径0.22μm）过滤，即得去菌体无菌液，4℃贮存备用吸取悬液0. ml，加入到熔化并冷却到50℃的6ml 0.7%琼脂的A培养基内，混合均匀后，作为上层培养基，倾覆在预先已凝固的A平板上。 待上层培养基凝固后，在每块平板上：内—0.6cm、用移液枪分别向每个内加入不同处理无菌发酵滤液各ul，然后将平板放置在养箱培养。48h后，观察各处理液抑菌能力的大小。2.2.3 测抑菌圈直径 测定经培养的抑菌平板的直径，并图示接菌量对JK-2发酵液抑菌活性的影响。 3试验结果 3.1 接种量对JK-2发酵液抑菌活性的影响 表1 接种量对JK-2发酵液抑菌物质抑菌圈直径 抑菌圈直径(mm) 接种量 Ⅰ Ⅱ Ⅲ 均值 0.2% 12 13 12 12.6 0.5% 14 15 14 14.6 1% 17.5 18 18 17.8 2% 18 17 17 17.7 3% 17 17 16 16.7 4% 18 16 16 17.0 5% 18 15 15 18.3 图1：接种量对JK-2发酵抑菌活性的影响 图1图2 图图 图2 接菌量不同的发酵液无菌滤液对大肠杆菌抑菌圈直径 4试验结论 试验结果表明， 5参考文献 [1] 陈中义，张杰，黄大肪．植物病害生防芽孢杆菌抗菌机制与遗传改良研究[J]．植物病理学报，2003，33（2）：97-103 [2] 何红，蔡学清，关雄，等．内生菌BS-2菌株的抗菌蛋白及其防病作用．植物病理学报，2003，33（4）：373-378 [3] 王雅平，刘伊强，潘乃燧，等．抗真菌蛋白BII的分离纯化及其性质研究．生物化学与生物物理学报，1993，25（4）：391-397[4]参考已有的试验报告。 试验设计：试验人员： １ ２ 第 ２ 页 共 5页 试验报告