1 miRNA在甲状腺滤泡细胞源性肿瘤中的研究进展 王培松1 张文天2 .DOCVIP

miRNA在甲状腺肿瘤研究进展microRNA（miRNA）；甲状腺癌(thyroid carcinoma)； 前言：甲状腺癌发病虽只占甲状腺结节的5%[1]、全身肿瘤的1%,却是内分泌系统最常见的恶性肿瘤[2]。近年许多资料显示甲状腺癌的发病率有逐年上升趋势。其分别机制仍不明了。细针穿刺细胞学活检是术前诊断甲状腺肿瘤的金标准，然而仍有20%-30%不能确定者[3]，目前尚无理想的肿瘤标志物用于甲状腺癌诊断。microRNA(miRNA)是一类对基因具有调控功能的内源性非编码小分子RNA，通过与靶mRNA 完全或不完全互补配对，引起mRNA 降解或翻译抑制，从而对基因转录后水平进行调控。目前认为miRNA 在多种生物学过程中起着至关重要的作用，包括细胞增殖、分化、凋亡等。研究显示miRNA 的表达异常能导致疾病甚至肿瘤的发生，有类似于抑癌基因或癌基因的功能。因此miRNA的研究对于揭示甲状腺肿瘤发病机制、作为肿瘤标志物提高细针穿刺病理活检诊断率具有重要的临床意义，同时血清中miRNA的发现及其相关研究成为最近研究的热点， [4-10]，这也为miRNA将成为方便无创性肿瘤标志物成为可能[11]。但在甲状腺疾病血清学方面研究尚无报道。 1 miRNA的发现 上世纪90年代初，Lee等[12]在研究秀丽隐杆线虫的发育时首次发现了调控线虫细胞的时序发育miRNA-lin-4，它含有lin-4 mRNA 3UTR 互补的反义序列。2000年，Reinhart等[13]在线虫中发现了另一种小分子RNA-let-7，它具有与lin-4同样的调节机制，通过调控细胞的时序发育和分化来调节基因的表达；由于lin-4和let-7能对线虫发育阶段实时调控，所以又称为瞬时RNA（stRNA）。令人惊奇的是let-7的表达模式在进化关系较远的物种间具有高度的保守性，提示let-7对基因表达的调节具有普遍作用[14]。这个发现迅速引起了关注，在随后的几年中，研究者们在不同的生物体内发现了大量类似的小RNA，但它们中的大部分不具有时序性表达的特性，于是与stRNA一起被命名为“miRNA”。目前，在人类基因组中已发现1000多个miRNA，估计约30 %的蛋白编码基因受miRNA 的调控。大量研究表明，miRNA 表达异常在肿瘤发生发展中起着重要的作用[15]。 1、2 miRNA的功能特性 miRNA基因位于蛋白编码基因的内含子或基因间区。成熟miRNA通过装配到RNA诱导的基因沉默复合物(RNA induced silencing complex,RISC)后与靶基因mRNA 3′UTR特异性序列结合,引起mRNA切割或翻译抑制,从而在转录后水平干扰靶基因的蛋白质合成。目前认为miRNA主要通过以下两方面的机制介导转录后基因调节[15]：mRNA的降解和翻译抑制。同一个miRNA分子可以调控多个基因的表达,而一个蛋白编码基因可同时受到多种miRNA调控，组成了一个复杂的调控网络[]。[11]。但在甲状腺疾病血清学方面研究尚无报道。 3　 miRNA与甲状腺肿癌 (thyroid carcinomaTC) 3.1.1 miRNA上调与甲状腺乳头状癌 (papillary thyroid carcinoma, PTC） miRNA芯片微点阵分析发现与正常甲状腺组织相比PTC癌组织一些miRNA表达上调，包括miR-221, -222, -146, -21, -155, -181a及-181b. [28、29]。此外，在一些甲状腺乳头状癌病人癌旁组织miR-221同样表达上调，这表明miRNA可能作为早期的致癌机制诱导甲状腺癌发生[28]. miR-221, -222与-181b在正常甲状腺细胞(PC Cl3)并不能找到，然而，它们在转染了v-ras-Ki, v-raf, RET/PTC1, RET/PTC3, E1-Abl等之后高度表达。这些miRNAs在表达TRK, RET/PTC3及HPV E7的转基因动物甲状腺乳头状癌中同样显示高表达。而在正常小鼠甲状腺组织低水平表达[29]。自从遗传学损害在PTC被发现后miRNA表达谱已经用来分析基因突变。这项研究揭示了miRNA与基因突变状态极强的关联性。MiR-187在包含RET/PTC重排的PTC中高表达，而miR-221与-222在BRAF与RAS阳性及未知突变的PTC中高表达。RAS阳性PTC中miR-146表达最高。然而, PTC表达谱具有一些独立于基因突变状态的改变.这些miRNA上调机制仍然有待进一步研究。尽管PTC包括不同的亚型，如典型的、嗜酸细胞型、高细胞型、滤泡细胞型，目前尚未发现miRNA谱与PTC组织学亚型间明显地相关性。分析miRNA表达增高目的是帮助甲状腺乳头状癌细针穿刺活组织病理检