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使用QPix400系统自动筛选颜色克隆: 如蓝白克隆筛选 - Molecular .PDF
使用QPix400系统自动筛选颜色克隆:
如蓝白克隆筛选
在分子克隆过程中,筛选含有插入基因片段 本文重点描述了使用QPix420系统进行颜
的重组质粒转化子是一项必不可少的工作。 色克隆筛选实验的结果,通过DNA测序进
一种称为“蓝白斑筛选”的颜色报告基因可 一步验证了挑取克隆的准确性。 优势
以根据克隆颜色快速区分出重组和非重组的 • 通过白光高效监
克隆。尽管蓝白筛选提供了一个直观的辨别 控转化效率
重组克隆的方法,但是,在克隆挑取过程 蓝白筛选原理
中,过多的人工操作过程存在主观、速度 蓝白克隆筛选的分子机理依赖于LacZ报告 • 准确区分白色、
慢、易出错等问题。 基因,非重组的克隆具有一个编码B-半乳 蓝色或浅蓝色等
颜色
糖苷酶的功能LacZ基因。该酶分子联合宿
Molecular Devices QPix400系列微生物 主菌体表达的互补片段,可以将培养基中的
克隆筛选系统提供了一个自动化的解决方 • 智能化软件选择
X-gal转化为深蓝色的5-溴-4-靛蓝。相
案,尤其针对蓝白克隆筛选,通过白光成像 模块,可以自动
反,成功插入外源片段的重组质粒,LacZ
提供了准确高效的克隆转化检测方法。这个 或自定义筛选
基因失活,克隆颜色变为白色(Figure 1所
解决方案整合了QPix Software2.0蓝白筛
示)。
选模块、QPix颜色滤片以及可调平板适配
器。
Molecular Cloning
Gene of interest
CC
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