血红素氧合酶一1基因转染对大鼠心肌缺血再灌注.PDFVIP

ChinCritCareMed，June2009．V01．21。No．6 ·325· 土国危重塑叁塾医堂!!19年6月第；!鲞笙!塑 ·论著· 血红素氧合酶一1基因转染对大鼠心肌缺血／再灌注 损伤诱导心肌细胞凋亡的影响 李娜 王焱林 王成夭 何祥虎 代乐 【摘要】 目的探讨莺组腺相关病毒(rAAV)介导大鼠血红素氧合酶一1(rHO—1)基因转染对心肌缺血／ 再灌注(I／R)损伤大鼠心肌细胞凋亡的影响。方法95只体重225～250g的雄性SD大鼠随机分为假手术组 (n一29)。NS组、rAAV—EGFP组和rAAV—rHO一1组分别于大鼠左心室前后壁共取4点分别注入生理盐水、 rAAV—EGFP或rAAV—rHo—l病毒液共600弘l。在基因转染后3个月，各组处死3只大鼠。取注射部位心肌， 荧光显微镜下观察荧光蛋白的表达并计算转染率；用免疫组化染色和逆转录一聚合酶链反应(RT—PCR)检测 H0—1的蛋白和mRNA表达。采用结扎左冠状动脉前降支30rain、再灌注120min建立心肌I／R模型；成模后 处死大鼠测定其心肌梗死面积及心肌细胞凋亡指数(AI)，光镜下观察心肌组织病理学改变。结果荧光显微 镜下仅rAAV—EGFP组可见心肌有荧光蛋白表达，转染率为(53．5士2．O)％。与S0组比较，NS组、rAAV— 的蛋白及mRNA表达增加，心肌梗死面积减小，AI减少(尸均O．01)；NS组及rAAV-EGFP组心肌组织病 理学损伤较s0组和rAAV—rH0—1组为霞。NS组与rAAV—EGFP组间上述指标比较无统计学意义。结论 rAAV介导的rHO一1基因转染大鼠心肌细胞后，能够显著减少心肌细胞凋亡，从而减轻心肌I／R损伤。 【关键词】血红素氧合酶； 缺血／再灌注损伤，心肌； 基因转染， 腺病毒科 Effectsoftransfectionofrat on induced ischemia／ cardiomyocyteapoptosisbymyocardial hemeoxygenase—l inratsLINa，ⅣAⅣGYah—lin，WANG Xiang一^扰，DAIYue．Depart— reperfusioninjury Cheng-yao，HE ment of 430071，Hubei，China Anesthesiology，ZhongnanHospital，WuhanUniversity，Wuhan author：WANGYah—lin，Email：ⅣyL0342@sina．coqFg．cn Corresponding effectofrat carried [Abstract] To the by Objectiveinvestigate hemeoxygenase一1(rHO-1)gene recombinantadeno—associatedvirus(rAAV)on inrats． myocardialischemia／reperfusion(I／R)injury were divided Methods male 225～250 Ninety—fivehealthy weighing g randomly Sprague—Dawley(SD)rats int