高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒m 蛋白cd+ 4 t - 南京农业大学学报.pdfVIP

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2017-09-02 发布于天津
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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒m 蛋白cd+ 4 t - 南京农业大学学报.pdf

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高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒m蛋白cd4t-南京农业大学学报

摇南京农业大学学报摇 2011,34(1):107-112 摇 Journal of NanjingAgricultural University http:/ / 試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試試 + 方剑玉,郑其升,郭小参,等.高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒 M 蛋白CD T 细胞表位优势区的鉴定[J].南京农业大学学报,2011, 4 34(1):107-112 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒M 蛋白 + CD T细胞表位优势区的鉴定 4 1,2 1 3 2 1,2 1 1* 2 方剑玉 ,郑其升 ,郭小参 ,侯凤香 ,王琳 ,陶红梅 ,侯继波 ,陈溥言 (1.国家兽用生物制品研究中心,江苏南京210014;2.南京农业大学动物医学院,江苏南京210095; 3.河南农业大学牧医工程学院,河南郑州450002) 摘要:采用RT鄄PCR方法扩增猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)临床分离株的M基因(525 bp),通过设计4 对引物, 把M蛋白分成4段K1(78-112)、K2(98-131)、K3(118-153)、K4(139-174),分别扩增相应基因M1、K1、K2、K3 和K4,连接 pET-32a(+)表达载体,经鉴定后转化Escherichia coli BL21,经IPTG诱导表达,SDS鄄PAGE和Western鄄blot检测结果显示,分 3 3 别在相对分子质量30.8伊10 和24.4伊10 位置出现目的条带,重组蛋白均可与阳性血清发生特异反应。将蛋白M1免疫 BALB/ c小鼠,于第三次免2周后从小鼠脾脏分离淋巴细胞,分别用K1、K2、K3、K4蛋白进行体外刺激。流式细胞仪检测分泌IFN鄄酌细胞因子的T细胞的频率,K1蛋白刺激组显著高于其他组和对照组(P臆0.01)。结论:M1蛋白K1(78-112)段为 T细胞表位优势区。关键词:高致病猪繁殖与呼吸综合征病毒;M蛋白;T细胞表位;表位优势区 + 中图分类号:S852.4 3摇摇摇摇文献标志码:A摇摇摇摇文章编号:1000-2030(2011)01-0107-06 Identification of CD+ T cell epitope dominance region in M protein of 4 porcine reproductive and respiratory syndrome virus 1,2 1 3 2 1,2 FANGJian鄄yu ,ZHENG Qi鄄sheng ,GUO Xiao鄄can ,HOU Feng鄄xiang ,WANG Lin ,