排毒增益汤对弓形虫感染雄鼠细胞免疫的影响.pdfVIP

山东中医杂志2008年3月第27卷第3期 · 187 · 排毒增益汤对弓形虫感染雄鼠细胞免疫的影响 苑文英，刘秀华，李英豪 (河北大学医学部寄生虫教研室，河北保定071000) [摘要]目的：观察排毒增益汤对弓形虫感染雄鼠细胞免疫功能的影响，并探讨其作用机制。方法：采用AH株弓形虫包 囊感染8 w 龄雄鼠模型，设立正常对照组、模型组、乙胺嘧啶阳性药物组、排毒增益汤大、中、小剂量组。分别用MTT法、 ELISA法测定T淋巴细胞转化率和细胞因子IFN一7、IL-2和IL，4含量。结果：排毒增益汤各剂量组T淋巴细胞转化率和细 胞因子IFN一7、IL-2含量均高于模型组(PO．05)。结论：排毒增益汤具有提高弓形虫感染雄鼠细胞免疫功能的作用。 [关键词]排毒增益汤；弓形虫；细胞免疫；细胞因子 [中图分类号]R285．5 [文献标识码]A [文章编号]0257-358X(2008)03—0187—04 弓形虫是一种机会性致病寄生虫，进入机体是 天1次，连续7 d。给药方法：对照组：不感染包囊， 否发病及临床表现轻重与机体的免疫状态密切相 生理盐水经口灌服，日1次，每次0．5 ml。模型组： 关。它可以侵犯除红细胞外的任何细胞，临床表现 感染包囊后，生理盐水经口灌服，日1次，每次 复杂，近年来对雄性生殖系统的影响逐渐受到关注， 0．5 ml，乙胺嘧啶阳性药物组：感染包囊后，乙胺嘧 认为是造成雄性生殖能力下降乃至不育的重要原因 啶经口灌服，日1次，每次0．6 mg。排毒增益汤大 之一[ ～ 。 剂量组：感染包囊后，排毒增益汤原浓度经口灌服， 1 材料与方法 日1次，每次 0．5 ml。排毒增益汤中剂量组：感染 1．1 弓形虫株 AH株，购自安徽医科大学寄生虫 包囊后，蒸馏水将排毒增益汤以1：2的体积稀释，经 学教研室，由河北大学医学部实验中心保种，鼠脑传 口灌服，日1次，每次0．5 ml。排毒增益汤小剂量 代 2次，脑组织研磨检获包囊。 组：感染包囊后，蒸馏水将排毒增益汤以1：4的体积 1．2 实验动物 SPF级BALB／c小鼠购自河北医 稀释，经口灌服，日1次，每次0．5 ml。 科大学，由河北大学医学部实验中心动物室繁殖，8 1．7 实验指标及测定方法 周龄，体质量30±2 g雄性鼠。颗粒饲料喂养，自然 1．7．1 脾T淋巴细胞转化率测定 采用MTT法 光照，自由进食饮水。 (四甲基偶氮唑盐)__1]，小鼠拉颈处死，无菌摘取脾 1．3 药物 排毒增益汤组成：黄芪、淫羊藿、柴胡、 脏，将脾制成脾细胞悬液，然后将细胞悬浮于完全培 南瓜子、金银花、连翘、当归、甘草。经鉴定后，南瓜 养液(RPMI1640)中。调整浓度至 2×10。，取无菌 子研磨人药，余煎成汤剂，浓度为4．0 mg／m|，保存 96孔培养板，每孔加细胞悬液0．1 ml，共加2孔，一 于4℃冰箱备用，乙胺嘧啶，片剂，成都制药二厂生 孔加1O肛l ConA，一孔对照，置于5 CO：培养箱中， 产，批号 37℃，培养68 h，取出，加人 5 mg／m|的MTT溶液 1．4 试剂 小鼠血清IFN～7、II 一2、IL一4 ELISA检 10 l，于震荡器上混匀约1 min，继续培养4 h，取出 测试剂盒购 自深圳晶美生物有限公 司，批号 培养板，每孔加100 l DMSO(二甲基亚枫)，吹打混 匀后静置20 S，使紫色结晶完全溶解，将溶解液移人 1．5 造模 AH株弓形虫包囊 20个／只腹腔接种 试管，1 500 r／m，离心5 min。取上清液于1 ml比色 感染8 W龄雄鼠 另