内质网应激对微囊化HepG2细胞脂代谢影响及调控研究.pdfVIP

32卷 5期 中 国 生 物 医 学 工 程 学 报 V01．32 NO．5 October 2013 2013年 10月 ChineseJournalofBiomedicalEngineering 内质网应激对微囊化 HepG2细胞脂代谢影响及调控研究 肖 静 张 英 于玮婷 王 为 马小军 (中国科学院大连化学物理研究所 生物医用材料工程组 ，大连 116023) (南通大学公共卫生学院职业卫生与环境毒理学教研室，南通 226019) 摘 要 ：研究 内质 网应激发生对微囊化细胞脂代谢调节 的影响，探讨 内质 网应激拮抗剂对微囊化细胞生长代谢调 控的可行性。采用静电液滴法制备微囊化细胞 ，Real—timePCR法检测微囊化对葡萄糖调节蛋 白78(GRP78)和 c／ EBP同源蛋 白(CHOP)表达影响；通过 MTT法检测细胞活性，ELISA法检测 白蛋 白含量 ，乙烷 一丙酮法抽提测定胞 内总胆 固醇和甘油三酯含量 ，并 比较拮抗剂 四苯基丁酸 (4-PBA)干预后相关指标变化 。结果显示 ，微囊细胞 中内 质 网应激标识蛋 白GRP78和 CHOP表达量分别为同天数下平面细胞 3．6倍和 1．9倍 (P0．05)，胞 内总胆 固醇 (CHO)和甘油三酯 (TG)含量分别为平面细胞 1．7倍和 3．2倍 (P0．05)。内质 网应激拮抗剂 4-PBA在 1．0mM 可显著增加微囊化细胞活性 。干预后 GRP78和 CHOP基 因表达水平降低50％和30％(P0．05)，胞内CHO和TG 含量 降低 30％和 15％(P0．05)，并使 白蛋 白水平较对照组显著提高 (P0．05)。结果提示微囊 内存在 内质 网应 激 ，且与微囊细胞脂代谢失调有关；内质 网应激拮抗剂能缓解微囊对细胞 的以上作用 。 关键词 ：微囊化细胞 ；内质 网应激 ；葡萄糖调节蛋 白78；C／EBP同源蛋 白 中图分类号 R318 文献标志码 A 文章编号 0258—8021(2013)05—0606-07 EffectofEndoplasm icReticulum StressonLipid M etabolism in M icroencapsulatedHepG2CellsandExogenousRegulation XIAO Jingt ZHANG Ying YUWei—Ting WANGWei MA Xiao—Jun (LaboratoryofBiomedicalMaterialEngineering，DalianInstituteofChemicalPhysics， ChineseAcademyofSciences，Dalian116023，China) (DepartmentofOccupationalMedicineandEnvironmentalToxicology，SchoolofPublicHealth， NanTongUniversity，Nantong226019，China) Abstract：Toinvestigate therelationship ofendoplasmicreticulum stressand lipidmetabolism imbalance in microencapsulatedcells，wecomparedtheexpressionofglucoseregulatingprotein78 (G