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靶向抑制mirna鄄21 提高白血病k562 细胞对阿糖胞苷的敏感性
15 卷 4 期 生命科学研究 灾燥造援员5 晕燥援4 圆园11 年8 月 蕴蚤枣藻 杂糟蚤藻灶糟藻 砸藻泽藻葬则糟澡 Aug. 圆园11 靶向抑制miRNA 21 提高白血病K562 细胞 对阿糖胞苷的敏感性 1 2 1 3 1* 雪姣 , 李育敏 , 谷景义 , 郭 敏 , 费 嘉 (1. 南大学 医学院生物化学与分子生物学教研室, 中国广东 广州 510632; 2. 广西壮族自治区民族医院, 中国广西南宁 530001; 3. 南大学 医学院血液 研究所, 中国广东 广州 510632) 摘 要: 为研究以miRNA 21 为靶标的反义核酸(AMO miR 21)提高白血病K562 细胞对阿糖胞苷(Ara C)的敏感 性及可能的作用机制, 在LipofectamineTM 2000 介导下, 将化学合成的AMO miR 21 转染K562 细胞, 四甲基偶 氮唑蓝 (MTT) 法检测单独使用AMO miR 21 Ara C 以及两者联合使用对细胞增殖抑制作用, 并计算抑制率和 IC50; 流式细胞仪检测细胞凋亡; 实时定量PCR(Real time PCR)检测miRNA 21 及其候选靶基因Pdcd4 mRNA 的 表达水平; 免疫印迹 (Western blot) 检测Pdcd4 蛋白的表达水平. 结果显示Ara C 与AMO miR 21 联合使用后, IC50 从 1.95 滋mol/L 降低到0.84 滋mol/L, 敏感性提高到单用Ara C 的2.3 倍. AMO miR 21 联合Ara C 组细胞凋 亡明显增加(P0.05). AMO miR 21 显著抑制K562 细胞中miRNA 21 的表达水平(P0.05), 同时Pdcd4 的表达明 显增加(P0.05). 提示AMO miR 21 可以提高K562 细胞对Ara C 的敏感性, 其作用机制与靶向抑制miRNA 21, 进而诱导细胞凋亡有关. 关键词: miRNA 21; 反义寡核苷酸; 阿糖胞苷; K562 细胞; 化疗敏感性 中图分类号: R34; Q291 文献标识码: A 文章编号: 1007 7847(2011)04 0317 06 Enhanced Chemosensitivty of Leukemic Cells to Cytarabine by Targeted Suppression of miRNA 21 1 2 1 3 1* ZHU Xue jiao , LI Yu min , GU Jing yi , GUO Min , FEI Jia (1. Dep artment of Biochemistry and Molec ular Biology, Medical College of Jinan Unive rs ity, Guangz hou 5 10632, Guangdong, China; 2. Minz u Hosp ital of Guangxi Zhuang A utonomous Region, Nanning 530001, Guangxi, China; 3. Institute of Hematology, Medic
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