采用agilent bio-monolith 蛋白质a 色谱柱监测细胞培养液中的单克隆 .pdfVIP

下载本文档

3
0
约3.25万字
约 8页
2017-09-02 发布于天津
举报
版权申诉

采用agilent bio-monolith 蛋白质a 色谱柱监测细胞培养液中的单克隆 .pdf

1、本文档共8页，可阅读全部内容。
2、有哪些信誉好的足球投注网站（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

采用agilent bio-monolith 蛋白质a 色谱柱监测细胞培养液中的单克隆

采用Agilen Bio-Monoli h 蛋白质A 色谱柱监测细胞培养液中的单克隆抗体滴度应用简报生物制药与生物仿制药作者前 hu T Duong 在生物制药行业，单克隆抗体生产的下游加工过程通常包括三步色谱纯化：捕获、中间安捷伦科技有限公司纯化和精制纯化。蛋白质柱常在捕获步骤中使用，它能带来高通量（即分析能力和分 A 析速度），同时在浓缩目标分子和免疫球蛋白方面同样发挥了重要的作用。在投入高成本进行制备以及使用大量蛋白质柱之前；若想要对细胞培养上清液的单克隆抗体滴度和产 A 量进行监测，就需要通过小型（分析型）的处理工序来确定单克隆抗体的滴度，以便确定单克隆抗体产品的最佳采集时间。在本应用简报中，采用预填充的Agilent Bio-Monolith 蛋白质色谱柱进行了快速捕获细胞上清液中的单克隆抗体滴度的研究。 A 材料与方法所测得蛋白浓度为40 mg/mL。然后按说明往上清液中加入IgG1； 40 mg/mL 大肠杆菌上清液中加入2.5 mg/mL 纯化的人源化IgG1。磷酸二氢钠和磷酸氢二钠、一水合柠檬酸（，部件 Sigma-Aldrich 混合后，使用流动相（磷酸钠缓冲液，）按 A 20 mM pH 7.4 1:1 号C1901）和大肠杆菌细胞裂解试剂盒均购自Sigma-Aldrich （部比例进一步稀释此混合物，最终浓度为 1.25 mg/mL IgG1 和件号CB0500）。CHO 细胞衍生的人源单克隆抗体(IgG1) 购自Bio 20 mg/mL 大肠杆菌上清液。 Creative Labs。条件洗脱液用于平衡、结合、再平衡。此缓冲液含磷酸钠 A 20 mM 色谱柱：蛋白质（部件号） Agilent Bio-Monolith A 5069-3639 缓冲液 (pH 7.4)。制备 1 L 的20 mM 磷酸钠缓冲液 (pH 7.4) ，称样品：人源化IgG1 和大肠杆菌裂解液取3.1 g NaH O •H O 和10.9 g Na H