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Part II 化学小分子与生物大分子的相互作用 2.1 化学小分子与蛋白质的相互作用 2.1.1 化学小分子对蛋白质的沉淀作用：环境变化蛋白质胶体会 沉淀 可逆沉淀、不可逆沉淀、抗体-抗原沉淀(相互识别和结合而发 生的沉淀) 无机物沉淀:盐析, 金属离子沉淀 等电点沉淀: 沉淀剂类型 有机物沉淀: 聚合物沉淀: PEG 1 2.1.2 化学小分子对蛋白质的稳定作用 蛋白质变性：因物理或化学因素破坏了蛋白质的天然状态，引起 蛋白质理化性质改变并导致其生理活性丧失。 蛋白质的稳定性指蛋白质抵抗各种因素的影响，保持其生物活性 的能力。可以利用化学物质或化学方法使蛋白质稳定化，以有利 于蛋白质在体外的应用。 （强酸碱、氧化剂、表面活性变性剂） 使蛋白质稳定常用方法：固定化，添加剂， 化学共价交联修饰(交联剂) 2 2.1.3. 化学小分子对蛋白质侧链基团的共价修饰作用 用化学修饰的方法来判断化合物与蛋白质分子中哪类基团作用, 用于研究蛋白质结构与功能 1. 生物体内蛋白质加合物的形成:外源化合物经体内代谢与蛋白质作用 1） 3 2）蛋白质分子中的可反应基团： 3) 与白蛋白共价结合 4) 血红蛋白共价结合 5) 细胞内蛋白质共价结合 4 2. 特定的氨基酸残基侧链基团的修饰 是通过选择性的试剂或亲和标记试剂与蛋白质分子侧链上特定 的功能基团发生化合反应而实现的.其作用之一是用来研究蛋白质的 结构和功能的关系,并定向地改造蛋白质的性质和功能。 天然氨基酸侧链的修饰： 饰 修 的 基 巯 5 2 ）氨基的修饰 3 ）咪唑基的修饰 6 4 ）胍基的化学修饰 7 8 9 利用生物技术引入非天然氨基酸 Staudinger连接修饰: 是叠氮化合物和三苯基膦化合物作用形成酰胺键的反应。两 者相互作用脱去一分子氮气形成磷的亚氨基化合物，最终形成酰 胺键将两者相连接。通常在蛋白质中嵌入叠氮基团，然后与带有 修饰基团的三苯基膦衍生物实现连接，得到修饰的蛋白质。 10 Click反应修饰 • Click反应是指叠氮和炔发生[3+2]环加成的反应，这类反应产率 高、副产物少、选择性高。叠氮和炔烃的加成反应在Cu （Ⅰ） 的催化下，能使反应在4℃到室温下的水溶液中进行。 • 该反应在蛋白质修饰中有很大的应用前景。局限是铜离子的污 染。利用环张力