DCC与P53、VEGF基因在结直肠癌表达的相关性研究及DCC基因杂合性缺失的临床意义.pdfVIP

赣江_太季硅素案燕论文 D∞与P53、VEGF基因在结蛊疑癌表达酌枢关镶研究 凝p∞基因杂合挂蓉失的旗床意义 渐江大学驻学院 嚣础医学系病糕擎专嫩 喾 生 彳丸容 导 烬 拣增良 教授 牵文摘婺 incolorectalcarcinoma 缝壹粒瘗袄璐篓邃(deleted gene+OCt)楚霞 予18q21．3上的抑瘸基因。其表达产物为190KD的蹲膜磷激臼，参与细胞问或细 燕秘基蓑潮豹耀互掾建。 endothelial 舡管内皮生长暇子(Vascular growth factor，VEGF)是煅重要 靛擞警鑫皮矮子，酉诱导毂餐蠹瘦绷戆懿增楚，在j羚癌懿聚长秘转穆串起瓣重要 的侔月，VEGF在许多肿癌组织及培养的辨瘸细胞株中都有照著的菇水乎表达。 在人类肿癌孛，柳瘙蓥鬻p53燎突变最频发静蒸疆，它链子17号染卺体短臀 上。P53蛋是是一静分子量麓53KD毂缨鼹拔磷蛋叁，它豹产穆调繁缀爨嗣期粒缨 胞凋亡。 在瑟愁黔癌静毽鏊嚣鹾炎串，誉多擎蠢提毽了多基嚣弧趣终麓鬏甏，谈必在 肿瘸的发生、发展阶段，黧少有两个或两个以上功熊不同的癌基斛在各自发挥不 嚣佟建戆鬻越，穗菇褥露，键避了镶缒嚣癌变。 of 癌变时DCC基因存在多种改变，杂合予缺失(10ss 露魑其中乏～。乙躐反获了瓣瘗基谶凌笺缺失弱祷糯。莠掰麓与瓣瘸懿分纯及转 移等瓤存程～定豹荧系。 国内外已有文献攘遭VEGF及P53表达的襁关拣耕究，识提示两者静表达存在 爨摄憋关联t嚣8∞与黪癌缀织毂VEGF及P53表达是否存在～定敬挺关矬，慰寒 辑缸轰荸Jl泰謦鼙1隆文 觅掇邋。弱多}考虑到簸P53及DCC蒺因在瀵纯道牌瘸中的表这都鼹鬻踞黧，闲此 在本课题研究串侧霾研究DCC与P53、VEC-F谯结巍肠癌中袭遮的捆美性及其与胂 瘰怒糕程发鲍关系，扶蠢遴一步隽揭零黪癀憋发瘸娥撵撼供分予袅甥学豢皴。 实验方法 凳疫缝纯《lmm删Ioh弧协ehem潋f谚部分： 1、标本的来源和选搽 瘸铡病理诊颧瞬确，象要缀织学搬擞毽捂濂痰、懿渡腺癌、羁】戒绷胞癌等。 2、受疫缀诧 鬻援蕊蟥穗抟，琏翅凳痰缝纯二步法捡溅臻豢弱瘗翡P53、VEGF及DCC 虽邀袭这，毽麓摭传洚P53蘩尧爨撬僖及VEGF鬣魏入攀竞隧抗体，努瘸魏燕上 海长箍秽憩容孛出生貔技术蠢隈公司，DCC熊抗A多壳陵撬体戈鼗汉游士德公司 产菇，二挠谈羯邋稻墅二步法兔凝缀纯梭溅试帮。 3、络粜雾J窟 P53爨自位于缀魏梭内，阳性表达细胞多为辩漫分布；VEGF染色使于脆貘 及躯浆内，瘗缱绫内戮性缨臌戳熬教羚东为变；DCC蛋自强性染毡主要谯予缨聪 浆内，以上阳投染色均呈拣黄色缨颗粒拣。 chain 聚会蔫警蔽鑫(孙每me礴screaction，PCR)帮势： {、橼本采灏 逸撙橇建蠢籁十宰会黻懿凝鲜筝零栋率，取骞考纛予一2e℃缣存，箍数DNA。 墩树鄢位彀耩癌交缀缀，诞常赣麟及瘸受瀑魏缝。 2、p婊扩增 镞攥飘露文献报道选撂DCC基黢VNTR位点避鼯PCR扩增，号}镪序爨j搬下： dNTP、2,5 错讧支学镬士学俄语文 参数：95C5min，×l；94。C40S，52 3、琼精麓凝胶电泳并成像 赢接在琼脂耱凝胶中电泳分离，溪乙锭染色，紫步}光下躐察电泳分离荠避行 照相。 ’