iNOS、NT在补肾方剂预防糖尿病颌骨骨质疏松中的意义.pdfVIP

中文 摘 要 iNOS,NT在补肾方剂预防糖尿病 领骨骨质疏松中的意义 摘 要 目的:采用链w佐菌素 (streptozotocin,STZ)复制大 鼠糖尿病骨质疏松领骨模型，通过免疫组织化学方法，观 察补肾方剂及氨基肌 (AG)对大鼠糖尿病领骨骨质疏松 模型中，诱导型一氧化氮合酶(iNOS)及硝基酪氨酸(NT) 表达的影响。探讨补肾方剂对大鼠糖尿病领骨骨质疏松的 防治作用。 方法:选用6个月体重350克-400克SD雌性大鼠 38只，随机分为对照组8只，病理组9只，中药组10只，AG 组11只。对照组自由饮水，其余三组腹腔注射STZ溶液 (55mg/地体重)，制备糖尿病模型。注射STZ溶液3天 后，尾尖采血测空腹血糖，用代谢笼收集12小时尿测定 尿糖，确定糖尿病出现后，中药治疗组以中药 (1g生药 /ml)灌喂，每天每只3m1;氨基肌治疗组用稀释成3%o 的氨基肌溶液灌养;正常组和病理组自由饮食。12周末， 用代谢笼收集12小时尿测定尿糖;用双能X线机检测全 身骨密度;采取股动脉放血法处死动物，采静脉血测空腹 血糖及离心机分离血清备一氧化氮检测用;迅速分离动物 下领骨，固定于4%多聚甲醛，脱钙、常规石蜡包埋、切 片，行HE染色和SP法iNOS,Nl，免疫组化染色，光镜 观察。 结果:1.腹腔注射STZ3天后测尿糖、空腹血糖。空 中文 摘 要 腹血糖显著升高 (P0.05)，尿糖阳性，与正常对照组比 较有显著性差异。正常对照组大鼠尿糖阴性。糖尿病模型 建立。2.12周血糖、NO、体重、骨密度检测结果:病理 组大鼠与正常对照组大鼠比较，体重显著减轻 (P0.05), 空腹血糖显著升高(P0.05)。血清NO显著升高(P0.05), 病理组大鼠尿糖阳性，正常对照组大鼠尿糖阴性:病理组 大鼠全身骨骨密度比正常对照组明显降低 (P0.05)。中 药治疗组大鼠与正常对照组大鼠体重、空腹血糖、骨密度 无明显差异 (P0.05);与病理组大鼠相比，体重显著增 高，空腹血糖显著降低 (P0.05)，骨密度显著增加 (P0.05);与氨基肌治疗组大鼠相比，体重、空腹血糖 无明显差异 (P0.05)，骨密度显著增高 (P0.05).氨基 呱治疗组大鼠与正常对照组大鼠体重、空腹血糖无明显差 异 (P0.05)，骨密度降低 (P0.05).氨基肛治疗组较病 理组大鼠体重显著增高，空腹血糖显著降低 (P0.05), 骨密度无明显变化 (P0.05)0ME染色结果:正常对照 组，骨皮质较厚，成熟哈佛氏系统较多，且形态呈典型的 同心圆排列;骨小梁较密集，骨小梁粗大，排列整齐;骨 小梁为扁平状的成骨细胞，破骨细胞少见。病理组，骨皮 质较薄，哈佛氏系统少而不典型:松质骨区骨小梁较细小、 弯曲、粗细不均、排列紊乱，骨髓腔宽大;可见较多的成 骨细胞，细胞呈柱状，胞浆丰富，核大而深染;并可于骨 小梁边缘见较多虫噬状骨陷窝(Howship陷窝)及破骨细 胞，胞浆丰富、深染、核大，胞核为2-4个。AG组，骨 皮质增厚;骨小梁增粗，骨髓腔缩小;成骨细胞立方状或 扁平状;破骨细胞数目减少 (100倍镜下，每视野1-2个 中文 摘 要 破骨细胞)。中药治疗组，骨皮质较厚，成熟哈佛氏系统 较多;骨小梁明显增粗，排列整齐，成骨细胞扁平状，偶 见立方状成骨细胞，整齐地排列在骨小梁边缘;破骨细胞 罕见。4.免疫组化染色结果:iNOS在四组领骨组织中的 表达。正常对照组:成骨细胞表达弱阳性或阴性，破骨细 胞表达弱阳性或阴性，骨细胞及哈佛氏管未见表达，成纤 维细胞呈阳性表达。中药治疗组:成骨细胞表达弱阳性或 阴性，破骨细胞表达弱阳性，骨细胞呈阴性表达，哈佛氏 管内呈阳性表达，成纤维细胞呈阳性表达。氨基肛治疗组: 成骨细胞表达弱阳性，破骨细胞表达弱阳性，骨细胞呈阴 性表达，哈佛氏管内呈弱阳性表达，成纤维细胞呈弱阳性 表达。糖尿病骨质疏松组:成骨细胞表达强阳性或阳性， 破骨细胞表达阳性，骨细胞呈阳性表达，哈佛氏管内呈阳 性表达，成纤维细胞呈弱阳性表达。NT在各组领骨组织 中的表达。正常对照组:成骨细胞细胞浆呈淡黄着色，表 达弱阳性，破骨细胞表达阳性，骨细胞中未见表达，哈佛