12级七第16章 DNA的生物合成和损伤修复-熊宇芳.pptVIP

DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉(replication fork)，称为双向复制。 人着色性干皮病（XP）与DNA的核苷酸切 除修复基因缺欠有关; NER参与转录偶联修复 高等真核生物的NER作用： 重组修复（recombinational repair），通过与姐妹染色体正常拷贝的同源重组来恢复正确的遗传信息。 （四）重组修复 正在复制的DNA聚合酶可能遭遇尚未修复的DNA损伤，细胞防故障系统能够使复制体绕过损伤部位，这一机制就是跨损伤DNA合成。 （五）跨损伤DNA聚合酶能够跨越损伤部位合成DNA 第五节 DNA重组 DNA Recombination DNA重组的类型 同源重组 特异位点重组 转座重组 一、同源重组是最基本的DNA重组方式 同源重组(homologous recombination，HR) 是指发生在同源序列间的重组，它通过链的断裂和再连接，在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换。又称基本重组(general recombination)。 以E.coli的同源重组为例，了解同源重组机制的Holliday模型：  内切酶 (recBCD) DNA侵扰 (recA) 分支迁移 (recA) 内切酶 (recBCD) DNA 连接酶 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 3′ 5′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ Holiday中间体 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ Holiday中间体 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 3′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 3′ 5′ 5′ 5′ 5′ 3′ 3′ 3′ 3′ 内切酶 (ruvC) 内切酶 (ruvC) DNA 连接酶 DNA 连接酶 片段重组体 拼接重组体 片段重组体 ： 切开的链与原来断裂的是同一条链，重组体含有一段异源双链区，其两侧来自同一亲本DNA。 拼接重组体： 切开的链并非原来断裂的链，重组体异源双链区的两侧来自不同亲本DNA。 二、特异位点重组是特异位点间的遗传信息整合 由整合酶催化，在两个DNA序列的特异位点间发生的整合称位点特异的重组(site specific recombination)。 作用：DNA重排和倒位 整合与切除等。 （一）λ噬菌体DNA的整合 （二）细菌的特异位点重组 沙门氏菌H片段倒位决定鞭毛相转变 三、转座重组是插入序列和转座子介导的DNA移位 由插入序列和转座子介导的基因移位或重排称为转座(transposition)，又称转座重组(transpositional recombination)。 插入序列(insertion sequences, IS)组成： IR Transposase Gene IR 发生形式： 保守性转座(conservative transposition) 复制性转座(duplicative transposition) （一）插入序列转座 插入序列的复制性转座 转座子组成： 反向重复序列 转座酶编码基因 抗生素抗性等有用的基因 IR IR Transposase Gene 有用基因 （二）转座子转座 * * Pol ?（或Pol ?） 填补冈崎片段之间的空隙 DNA连接酶Ⅰ 封口 RPA 稳定解旋后的单链DNA 解旋酶 复制叉的形成和移动必不可少 拓扑异构酶 释放复制叉前进时产生的扭曲应力 (三) 引发和延伸发生DNA聚合酶?/?转换 识别染色体DNA复制起点和DNA局部解旋后，Pol ?/引发酶复合物结合于复制起点，这一步叫做引发体组装。 引发体组装包括DNA解旋酶与Pol ?/引发酶相互作用。 1. 解旋酶与Pol ?/引发酶相互作用组装引发体 2. DNA聚合酶?/?转换 真核DNA聚合酶转换和后随链合成 RNAse HⅠ/FEN1 Dna2/FEN1 (四) 切除RN