基因治疗视网膜母细胞瘤的研究进展.docVIP

　　基因治疗视网膜母细胞瘤的研究进展 【摘要】 　　基因治疗视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,RB）是近年来新型的治疗方法。我们从自杀基因、抑癌基因、抗血管生成基因这三方面对RB的基因治疗现状、相关进展及存在问题作一综述。 【关键词】 视网膜母细胞瘤；基因治疗 　　AbstractGene therapy of retinoblastoma(RB) is a neent in recent years. In this paper, ake a revies of RB from three aspects of suicide genes, tumor suppressor genes, antiangiogenic genes. 　　KEYa; gene therapy 　　0　引言 　　视网膜母细胞瘤（retinoblastoma,RB）是婴幼儿眼病中性质最严重，危害最大的一种恶性肿瘤。RB的治疗大多采用患眼眼球摘除术，局部保守治疗包括化学治疗、光凝治疗、冷冻治疗、加热治疗等。基因治疗是多种肿瘤治疗研究的热点，因为肿瘤的发生往往与人体内基因的变异或表达异常密切相关，基因治疗的目的就在于从基因水平上对这些异常予以纠正。作为基因治疗的靶组织，眼球因为其特殊的部位和结构，便于准确地将目的基因导入靶细胞，具有独特的优势。关于RB的基因治疗的研究已有十几年，现对近十年其研究现状、存在的问题及发展方向予以综述。 　　1　自杀基因的治疗 　　自杀基因疗法又称药物敏感基因疗法，即利用转基因的方法将前药酶解基因导入肿瘤细胞内，其基因表达产物能将原本无毒性的药物转化为细胞毒性物质，从而杀死细胞[1]。其中将单纯疱疹病毒胸腺嘧啶核苷激酶 (herpes simplex virus thymidine kinase，HSVtk)基因导入肿瘤细胞中表达，联合应用更昔洛韦 (gancyclovir，GCV)进行自杀基因治疗是目前最为有效的一种治疗方法。Huran正式提出“肿瘤生长依赖于血管生成”的观点。肿瘤生长分为两个阶段，血管前期和血管期。血管前期肿瘤主要通过弥散作用获得营养和氧，并运走代谢废物。当肿瘤体积增至1～2mm以上时，如无新血管长入，肿瘤组织将保持静止状态或退化[16]。一旦血管长入肿瘤，血液供应变为灌注，新生血管不仅为肿瘤组织提供足够的营养和氧，还提供大量的生长因子，促使肿瘤迅速生长。抗血管生成治疗以肿瘤新生血管为作用靶点，目的是切断肿瘤生长转移所需要的营养，从而达到“饿死”肿瘤的目的，目前已成为重要的抗癌策略。VEGF是目前发现的最重要的促血管生成因子之一，在肿瘤血管生成过程中发挥重要的调节作用。在众多血管调控因子中，VEGF是唯一能特异作用于血管内皮细胞的有丝分裂素。它一方面可以增加血管通透性，有利于血浆蛋白、纤维蛋白原外渗，促进血管生成和新基质形成，另一方面，VEGF促进血管内皮细胞有丝分裂，刺激血管内皮细胞增殖[17]。Jia等[18]将针对VEGF的小干涉性RNA质粒转染入人Rb细胞内，发现稳定转染的血管内皮生长因子siRNA可以抑制Rb细胞VEGF的表达，对RB瘤体血管的生成和肿瘤的发生起到了抑制作用。Mahasreshti等[19]采用鼠皮下的RB模型，以重组腺病毒为载体，将编码可溶性VEGF受体1的cDNA导入，发现肿瘤体积明显缩小。微血管密度被证实了在肿瘤的发生和机制上所起的作用。Rossler等[20]在107例RB患者中，通过CD31免疫组织化学法来检测微血管密度，发现血管化程度的增高与侵入脉络膜与视神经有关。18例转移癌患者的微血管密度显著性的高于未发生转移的癌症患者。Marback等[21]做了类似的研究，在25例RB患者中，研究人员用CD34检测肿瘤血管区，发现肿瘤的血供越丰富发生转移的可能性越大。目前，抗肿瘤血管生成基因治疗尚处于实验研究阶段，但初步结果是令人鼓舞的。由于肿瘤血管的新生是一个复杂的生理、病理过程，肿瘤生成涉及诸多方面，对于其分子机制还有待于进一步研究。目前尚未明确肿瘤血管的特异性标志，即肿瘤血管与正常血管的差异性标志，如果能在这方面取得更多的发现，将有助于开发出特异性的抗肿瘤血管生成抑制剂。但由于抗血管生成基因治疗较传统抗癌治疗具有不可比拟的优势：（1)抗血管新生基因治疗的靶向性：内皮细胞具有遗传稳定性，不易产生耐药；(2)直接作用于肿瘤血管内皮细胞，局部浓度高。总之，血管生成是肿瘤生长转移过程中的重要环节，抗血管生成治疗，尤其是抗血管生成的基因治疗作为抗肿瘤治疗的新靶点，具有广阔的应用前景。在整个基因治疗的研究领域中，安全、高效、靶向基因载体的研究和开发是关键和瓶颈问题[22]。目前关于基因转移多采用病毒载体，具有较高的转染率和高表达能力，这是其他非病毒载