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茄科枯萎病原菌致病性分化及其与植株内生菌的相互关系
六.番茄尖孢镰刀菌土壤中的定殖特性 GFP菌株在不同土壤中的消长动态 六.番茄尖孢镰刀菌土壤中的定殖特性 不同土壤中转GFP基因菌株的荧光观察 2d 16d 8d 4d 32d 七.番茄尖孢镰刀菌对土壤微生物群落结构的影响 材料与方法 FJAT-3993 样本 甲 酯 化 中 和PH 萃 取 转 移 泥潭土 菜园土 水稻土 沙土 脂 肪 酸 测 定 七.番茄尖孢镰刀菌对土壤微生物群落结构的影响 PLFAs法分析转化后菌株对土壤微生物群落结构的影响 FJAT-3993对土壤中脂肪酸生物标记总量和种类的影响 菜园土 水稻土 泥潭土 沙土 七.番茄尖孢镰刀菌对土壤微生物群落结构的影响 FJAT-3993对土壤真菌、细菌及放线菌特征性脂肪酸标记的影响 菜园土 水稻土 泥潭土 沙土 八 .结论与展望 采集分离了茄科作物发病地区的植株及根际土的内生真菌,经鉴定为镰刀菌属真菌引起,其中优势菌群为尖孢镰刀菌。 采用CaC12-PEG介导的方法成功构建了茄科尖孢镰刀菌的GFP转化体系,对转化子的生物学特性进行了分析。荧光稳定性研究表明,其荧光稳定强烈,有利于后续研究。 运用CLSM对番茄植株进行光学切片,揭示了标记菌株在植株体内的侵染定殖路线。 标记菌株可以在不同性质的土壤中很好的定殖。PLFAs分析表明,标记菌株对各土壤脂肪酸生物标记总量影响各不相同,但种类上都呈增长态势,且各土壤的细菌特征性脂肪酸都占绝对优势。 利用CLSM对标记菌株对植物细胞组织学的研究值得进一步深入研究。 引入的异源菌株能否使植株对病原菌的侵染产生抗性及对植株酶活的影响都需要继续做深入的研究。 致谢 感谢我的导师刘波研究员对我的精心指导,三年来使我学到了很多宝贵的专业知识与实验技能,终生受用。 感谢福建省农业科学院农业生物资源研究所肖荣凤老师对我的严格要求,以及对我论文的耐心指导及在实验等方面给予的无私帮助。 感谢实验室各位老师在实验、生活等方面热心帮助。 感谢我的家人、朋友三年来在背后对我的支持。 谢谢各位评委老师! * * 茄科尖孢镰刀菌绿色荧光蛋白基因转化体系的优化及其定殖特性的研究 答辩人:朱磊 专业:微生物学 导师:刘波 研究员 主要内容 一.前言 二.茄科作物枯萎病原的分离及鉴定 三.番茄尖孢镰刀菌GFP转化体系的优化 四.番茄尖孢镰刀菌GFP转化子的生物学特性 五.番茄尖孢镰刀菌在植株体内的侵染定殖 六.番茄尖孢镰刀菌在土壤中的定殖特性 七.番茄尖孢镰刀菌对土壤微生物群落结构的影响 八.结论与展望 一.前言 茄科 (Solanaceae),分布于热带和温带地区。茄属Solanum、烟草属Nico-tiana、辣椒属Capsicum、番茄属Lyco-persicum、枸 杞属Lycium等都很有经济价值。 尖孢镰刀菌属半知菌类(Fungiimperfecti) 、 梗孢目(Moniliales) 、痤孢科(Tubercular) 、 镰刀菌属(Fusarium)。 健康田块 发病田块 Fusarium oxysporum Schl. GFP及其在丝状真菌中的研究概况 GFP这一新型报告基因,优点: (1)荧光稳定 (2)GFP对受体细胞无毒害 (3)通用性 (4)无假阳性干扰 (5)检测便捷 GFP已广泛运用在各种丝状真菌的分子生物学研究 核盘菌属、木霉属、球腔菌属、疫霉属、镰刀菌属等。 一.前言 一.前言 致病菌(FJAT-282) 侵染机制 标记菌株 微生态群落结构 GFP转导 生物防治 致病机理 二.茄科作物枯萎病原的分离及鉴定 材料与方法 植株及根际土的采集(不同地区、不同寄主等) DNA提取 枯萎病危害调查及其发病症
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