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Bax、Bcl-2蛋白表达在非酒精性脂肪肝的作用及药物干预研究 专 业 : 内科学 导 师 : 赵和平 教授 研究生 : 解燕茹 目 录 一、立题依据 二、课题设计 三、本人对选题的见解 四、预期成果 五、研究计划及预测进展 一、立题依据 1.立题背景 2.国内外研究现状 3.NAFLD与Bax、Bcl-2 4.药物干预 1.立题背景 　非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty 　liver disease,NAFLD)是指除外酒精和其 　它明确的损肝因素所致的,以弥漫性肝细胞 大泡性脂肪变为主要特征的临床病理综合 征。 根据病理学改变及临床表现，分为单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝纤维化并且可逐渐进展为肝硬化、肝癌等终末期肝病，已成为目前仅次于慢性病毒性肝炎和酒精性肝病的重要肝硬化前期病变。 流行病学显示： 　普通成年人NAFLD患病率为17%～33% 西方国家NAFLD的患病率为20%～30% 亚太地区人群的患病率为12%～24% 随着肥胖和糖尿病患者的增多，NAFLD 患病率很有可能在下一个十年时显著增加。 2.国内外研究现状 2.1 NAFLD 发病机制 3. Bax Bcl-2 Bax 和Bcl-2是Bcl-2 基因家族中分别促进和 抑制肝细胞凋亡的结构相似、作用相反的一 对胞内蛋白质。 4.药物干预 二、课题设计 1.研究目的 2.研究方法技术路线 3.观察指标及测定方法 4.统计学方法 5.可能遇到的问题及解决办法 1.研究目的 1. 观察高脂饮食诱导的NAFLD大鼠肝脏 Bax、Bcl-2蛋白的表达。 2. 观察降脂益肝冲剂的疗效,探讨其治疗机 制是否通过调节肝脏Bax、Bcl-2蛋白的表达来实现。 2.研究方法技术路线 3.观察指标及测定方法 1） 对肝组织病理观察：HE染色观察，光镜下评估肝脂肪变性程度，并计算炎症活动度计分。 2）全自动生化分析仪测标本血清中ALT 、AST 、TC、 TG。 3） Western Blot测定Bax、Bcl-2蛋白表达。 4.统计学方法 全部数据经SPSS软件包进行统计分析。 计量资料用?x ?s表示，组间均数比较采用方差分析法，各组之间两两比较采用LSD-t检验。 P0.05表示差异有显著性意义,P0.01表 示差异非常显著。 5.可能遇到的问题及解决办法 1）高脂模型的建立，从动物的选择、饲养、到高脂饲料的配制都要严格按照实验动物所要求的操作，避免由于人为因素而造成的造模失败。 2）灌胃方法的准确与熟练，由于操作原因或技术水平，可能致动物死亡，可通过多次练习，严格无菌操作以及增加样本含量来解决。 3）Western Blot实验条件的摸索，可以通过预实验为正式实验的顺利开展做好准备。 三、本人对选题的见解 科学性：高脂饮食诱导的大鼠NAFLD模型 更接近于人类的自然发病模型，因此对人类 NAFLD发病机制和治疗的研究有可借鉴之处。 实用性：NAFLD的发病率逐年升高，影响范围甚广，严重危害人民的身心健康，但至今NAFLD的发病机制尚不清楚，并且没有有效的治疗手段，所以探讨其发病机制、寻求有效治疗具有十分积极的临床及社会意义。 创新性：所查国内外文献,较少见报道Bax、Bcl-2蛋白在NAFLD发病机制中作用的研究;其可靠性需进一步证实，且罕见药物干预Bax、Bcl-2蛋白表达的研究。因此我们设计该实验，通过对NAFLD肝脏Bax、Bcl-2蛋白表达情况的监测,分析其在NAFLD的作用机制，同时采用药物干预,研究该药物对NAFLD的防治作用,探讨其可能的分子治疗机制。 可行性 ： 1）.已查阅大量与课题相关的中英文文献； 2）.导师赵和平教授有深厚的学术造诣和丰富的临床经验可为实验提供理论指导； 3）.基础医学院拥有完备的实验仪器和设施,教研室老师经验丰富，可提供技术指导； 4）.经费已落实。 四、预期成果 1）.通过分析NAFLD肝组织中Bax、Bcl-2蛋白的表达情况，进一步研究NAFLD的发病机制。 2）.进一步证实降脂益肝冲剂的疗效, 并探讨其治疗机制是否通过调节肝脏Bax、Bcl-2蛋白的表达来实现。 五、研究计划及预测进展 2008.12--2009.2 查阅相关资料，完成课题 方向 2009.3--2009.7 进行动物饲养及实验 2009.8--2009.9