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测定茶叶中二氯联苯的酶联免疫吸附分析新方法.pdf
第29卷第5期 分析试验宅 、r01.29.No.5 2010年5月 Chinese of 2010—5 JotmIalAnalysisLabomtory 测定茶叶中二氯联苯的酶联免疫吸附分析新方法 庄惠生¨一,杨丽波2,陈寒玉2 摘要:建立了测定茶叶中痕量3,4.二氯联苯(PCBl2)的间接竞争酶联免疫吸 附分析(ELISA)新方法。工作曲线方程为I=62.01+17.5519p,相关系数为 出限I%(抑制率为20%时)PCBl2的质量浓度为4.0n∥L,交叉率小于1.0%。 对市售铁观音茶叶做简单前处理后,用ELISA方法检测。加标回收实验显示回 收率为94.5%一112.4%,相对标准偏差为4.O%一12%。 关键词:3,4_二氯联苯;ELISA;茶叶;测定 中图分类号:X835文献标识码:A 文章编号:1000-0720(2010)05-033-03 多氯联苯(PCBs)具有高毒、难降解、强脂溶l实验部分 和生物累积等特性,能够导致生物体内分泌紊乱、 1.1仪器与试剂 生殖和免疫机能失调、神经毒性以及癌症等严重 疾病,其毒性对生物体具有潜在的不可逆性…。尽 Pure sJ_4A 旋转蒸发仪;Easy RoDi(Barnstead);pH 管20世纪70年代就禁止生产和使用PCBs,但全 实验室pH计;96孔普通酶标板;卵清蛋白;辣根 球已生产130万吨,在工业发达的国家和地区已 发现较高的PCBs浓度【2’3】,即使在南极地区也发 现PCBs的踪迹¨J。 (本实验室自制提纯)【l¨;PCBl2固体物质m】用甲 本文主要是利用酶联免疫吸附分析(EIJIsA)方醇(分析纯)溶解;碳酸盐缓冲溶液CBS 法检测茶叶中痕量PCBl2,较之气相色谱法[5正】,(0.05 mol/L,pH 不仅减少了繁琐的前处理过程,而且检出限更低, 冲稀释液PBS(O.01 7.4);封闭液:1% mol/L,pH JC等用ELISA方法检测土壤 价格更低廉。Zhuang 和灰尘中多氯联苯总量,许艇等对共面多氯联苯 液:TMB md/L liquid.1component;终止液:2 进行ELISA检测,邓安平教授用ELISA方法检测 H2S04,以上试剂用水为高纯水。 Soo 土壤中PCBl5含量,InKim等对电气绝缘油中 1.2实验方法 五氯联苯和六氯联苯进行ELISA检测等【7加】,但 包被原100止/孔包被酶标板,4℃冰箱过夜; 是国内外对PCBl2的ELISA检测尚未见报道。 次日取出酶标板,倾去孔内液滴,用滴管加满 本实验对影响ELISA分析的条件进行分析选 PBST,静置3rain倒去,重复3次,将酶标板扣在 择,最终建立工作曲线方程,=62.01+17.55190,吸水纸上以除净液体;加封闭液200刖孔,37℃ 检出限I%(抑制率为20%时)PCBl2的质量浓度 恒温箱温育60
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