角叉菜胶致大鼠尾部血栓形成的机制.pdfVIP

CHINKSE OFINTEGRATIVEMEDICINEONCARDIO一／CEREBROVASC53LARDISEASE2008V01．6No．5 ·542· JOURNAL May 角叉菜胶致大鼠尾部血栓形成的机制D 魏陵博，戎冬梅，占中强，J‘书文 摘要：目的揭示角叉菜胶造成大鼠尾部血栓模型的诀窍和机制。方法将大鼠随机分为正常组、模型组、阿司匹林组，灌胃1 个月。模型组、阿司匹林组用角叉菜胶构建尾部血栓模型，观察不同时间的黑尾长度，检查抗凝血酶Ⅲ(AT—Ifl)活性、D一二聚体、 结论只要控制好条件，角叉菜胶是一种简便易行的动物血栓造模试剂。 关键词：角又菜胶；血栓形成；凝血机制；炎症因子 中图分类号：R285．6 文献标识码：A 文章编号：1672—1349[2008)05—0542—02 角叉菜胶是从海藻中提取的含硫酸多糖物质，可用于制备 18℃±1℃室内饲养，测量大鼠造模24h、48h、72h后大鼠黑 多种组织炎症模型，胡三觉教授发现可以用它造成大鼠尾部血 尾长度。 栓形成模型，认为通过局部炎症与内皮细胞的损坏引起血栓…1。 1．4分组灌胃与指标检测36只大鼠随机分为正常组、模型 组、阿司匹林组，各12只。灌胃1个月，灌胃容积0．01 本研究旨在对造模的机制进行进一步说明，并研究角叉菜胶对 mL／(g·d)， 大鼠凝血、抗凝、纤溶系统和炎症因子的影响。 正常组和模型组予生理盐水灌胃；阿司匹林组将肠溶阿司匹林 1材料与方法 1．1实验动物选用体重200 当于60 g±10g的Wistar大鼠，12周 kg成人100m。g／d剂量(1．7mg／kg)的12倍。造模成 龄，雌雄各半，由山东大学实验动物中心提供。许可证号：SCXR功并测量黑尾长度后，各组大鼠以戊巴比妥钠麻醉，下腔静脉取 全血，装于试管，分离血清，检测AT一Ⅲ活性(发色底物法)、 1．2试剂及主要实验仪器肠溶阿司匹林，每片25nag，济南 永宁制药股份有限公司；角叉菜胶(c1013 TypeISigma)；抗凝血免法)，由山东中医药大学附属医院核医学室检测。 酶Ⅲ(AT一Ⅲ)活性测定试剂盒，D一二聚体含鼍测定试剂盒，组 另将30只大鼠随机分为3组，每组各lO只，灌胃4个月， 织型纤溶酶原激活物(PAI)活性和组织型纤溶酶原激活物的抑造模后下腔静脉取全血，分装于两个试管，以枸橼酸钠抗凝，取 制物(t—PA)活性测定试剂盒，均购自上海太阳生物技术公司。全血3mL即查血浆凝血酶原时间(PT)、血浆纤维蛋白原(Fb)、 自介素一1p(IL-1p)、白介素一6(IL一6)、肿瘤坏死因子a(n旧一a)凝血酶时间(1vr)，另取全血2mL分离血浆，备查t—PA、PAI 含量测定免疫试剂盒，购自北京东亚免疫技术研究所。 活性，由山东中医药大学附属医院化验室检测。 江苏省医疗电子研究所提供的GMI型全自动放射免疫71．5统计学处理采用PEMS3．1统计软件统计，用方差分析 计数器；CA一500血凝仪(北京威士达医疗有限公司)；意大利产及(r检验做统计学分析。 全自动酶标仪，BRIO；上海博迅实业有限公司提供的SSW型电2结果 热恒温水槽；上海安亭科学仪器厂提供的DDL一5型冷冻离心2．1角叉菜胶对大鼠AT一Ⅲ活性和D一二聚体含量及炎症因 机。 子的影响 角叉菜胶能够造成大鼠尾部血栓模型，阿司匹林灌 1．3用角叉菜胶制作大鼠尾部血栓模型方法精密称取角叉 胃不能减轻血栓形成，角叉菜胶能造成大鼠IL一1口明显升高， 菜胶，以生理盐水配成4％浓度；给大鼠称重，乙醚麻醉，于后足 D一二聚体降低。详见表1。 跖部皮下注射角叉菜胶，剂量为20 mg／kg，造模后将大鼠