HPLC法测定女贞子决明子与菟丝子.docxVIP

ADDIN CNKISM.UserStyle一．HPLC法测定女贞子药材中女贞苷的含量 1. 仪器与试药 美国Water 2695 高效液相色谱系统，Water 2996 UV检测器，Empower数据管理系统，FW80型高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），ML204/02、MS~205电子天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司），TDL-80-2B型离心机（上海安亭科学仪器），KH-500型超声波清洗仪器（昆山禾创声波仪器有限公司），甲醇（分析级，南京化学试剂有限公司），水(Milli-Q,MilliporeS.A.Molsheim,France)，乙腈(色谱纯，美国 Tedia公司)。女贞苷对照品（Solarbio公司，批号：SL8490） 方法与结果 2.1 对照品储备液 精密称取女贞苷3.47 mg，置10 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0.347 mg·mL-1的对照品储备液。 2.2 供试品溶液 取本品粉末（过三号筛）约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇40 mL，称定重量，超声处理45分钟，取出放冷，用50%的甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，0.45 μm滤膜滤过，即得。 2.3 色谱条件 色谱柱BDS HYPERSIL C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱温25 ℃；流速1 mL/min；检测波长：224 nm；进样量10 μL，以乙腈（A）：超纯水(B)为流动相进行梯度洗脱：0~28 min，15 ％~40 ％A。样品与标品的HPLC色谱如图所示。 2.4 女贞子药材中女贞苷含量 二．HPLC法测定决明子药材中大黄酚与橙黄决明素的含量 1. 仪器与试药 美国Water 2695 高效液相色谱系统，Water 2996 UV检测器，Empower数据管理系统，FW80型高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），ML204/02、MS~205电子天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司），TDL-80-2B型离心机（上海安亭科学仪器），KH-500型超声波清洗仪器（昆山禾创声波仪器有限公司），甲醇（分析级，南京化学试剂有限公司），水(Milli-Q,MilliporeS.A.Molsheim,France)，乙腈(色谱纯，美国 Tedia公司)，其他试剂均为分析级。大黄酚对照品（Solarbio公司，批号：SC8260）；橙黄决明素对照品（Solarbio公司，批号：SA8690） 方法与结果 2.1 对照品储备液 取大黄酚对照品、橙黄决明素对照品适量，精密称定，加无水乙醇-乙酸乙酯（2:1)混合溶液制成每l mL含大黄酚0.219 mg、橙黄决明素0.145 mg的混合溶液，即得。 2.2 供试品溶液 取本品粉末(过3号筛)约0.5 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇50 mL，称重，置水浴上加热回流2 h，放冷，再称重，用甲醇补足失重，摇匀，滤过。精密量取续滤液25 mL，蒸干，加稀盐酸溶液30 mL，置水浴中加热水解1 h，立即冷却，用三氯甲烷振摇提取4次，每次30 mL，合并三氯甲烷液，回收溶剂至干，残渣用无水乙醇-乙酸乙酯(2∶1)使溶解，溶解转移至25 mL量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，取续滤液作为供试品溶液。 2.3 色谱条件 色谱柱BDS HYPERSIL C18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；柱温25 ℃；流速1 mL/min；检测波长：284 nm；进样量10 μL，以乙腈（A）：超纯水(B)为流动相进行梯度洗脱：0~15 min，40％A，15~30 min，40％~90％A，30~40 min，90％A样品与标品的HPLC色谱如图1所示。 A.对照品；B.样品；1.橙黄决明素；2.大黄酚 2.4 决明子药材中大黄酚与橙黄决明素含量 本品按干燥品计算，含大黄酚（C15H10O4)为0.167%，含橙黄决明素（C17H14O7)为0.082%。 三．HPLC法测定菟丝子药材中金丝桃苷的含量 1. 仪器与试药 美国Water 2695 高效液相色谱系统，Water 2996 UV检测器，Empower数据管理系统，FW80型高速万能粉碎机（天津市泰斯特仪器有限公司），ML204/02、MS~205电子天平（上海??特勒-托利多仪器有限公司），TDL-80-2B型离心机（上海安亭科学仪器），KH-500型超声波清洗仪器（昆山禾创声波仪器有限公司），甲醇（分析级，南京化学试剂有限公司），水(Milli-Q,MilliporeS.A.Molsheim,France)，乙腈(色谱纯，美国 Tedia公司)。金丝桃苷对照品（南京春秋生物工程有限公司） 方法与结果