2015公开课讲课用微生物实验室培养.ppt

到目前为止， 几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖 都与微生物学有关;微生物的类群;1.细菌的形态;拟核，大型环状DNA;细菌主要是以二分裂的方式进行增殖（如右图）;芽孢;例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.;?真菌是通过产生大量的孢子来繁殖后代的，霉菌的直立菌丝 顶端生有孢子，蘑菇的菌褶处也生有孢子，孢子随风飘散， 在适宜的环境条件下，能发育成一个新个体。单细胞的酵母 菌还可进行出芽生殖。孢子生殖和出芽生殖都是无性生殖。 ;专题2 :微生物的培养与应用; 培养微生物需要解决的两个问题是什么？;1.何为培养基？;（一）培养基 ;2.培养基的种类;液体培养基：;半固体培养基：;固体培养基：菌落;单个 或少数菌体;几种菌落及其形态;几种菌落及其形态;3.基本成分：;特殊营养物质：生长因子;注意：;此外，还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质（如:生长因子)以及氧气等的要求。;牛肉膏蛋白胨培养基 是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基。; 牛肉膏是用新鲜牛肉经过剔除脂肪、消化、过滤、浓缩而得到的一种棕黄色至棕褐色的膏状物。牛肉膏主要含有肌酸、肌酸酐、多肽类、氨基酸类、核苷酸类、有机酸类、矿物质类及维生素类的水溶性物质。此外含硫氨酸较多，而且含有更多的细菌生长需要的维生素和其它生长因子，是生物制药发酵及和种培养基制备的基础原材料。;选择培养基; 4.配制原则 ;C;２.自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别是( ) A．碳源 B．氮源 C．无机盐 D．特殊营养物质;1.何为无菌技术？无菌技术包括哪些方面？;获得纯净培养物的关键是什么？;　（１）消毒定义： 　　利用较为温和的化学或物理方法，杀死大部份致病微生物的过程。 ;　　（2）灭菌的定义：;1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min 2、巴氏消毒法：70-75 ℃下煮30min 或80 ℃ 下煮15min 3??化学药剂消毒法:用70%酒精、新 洁尔灭等进行皮肤消毒;氯气消毒水源 4、紫外线消毒 ……;1、灼烧灭菌;2、干热灭菌： 160-170 ℃下加热1-2h。 3、高压蒸汽灭菌： 100kPa、121 ℃下维持15-30min.; 最常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，它可以杀灭所有的生物，包括最耐热的某些微生物的休眠体，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用高温干热灭菌。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。;吃戚丝疫媒蘑迁橙招荡畏教乃尧霄谋燥酿羌炼雌赁嵌宵燕龋轴民俯刀埋幼2015公开课讲课用微生物实验室培养www.DearEDU.com;高压蒸气灭菌的原理是（ ） A．高压使细菌DNA变性 B．高压使细菌蛋白质凝固变性 C．高温烫死细菌 D．高温使细菌DNA变性;关于灭菌和消毒的不正确的理解是 A．消毒和灭菌实质上是相同的 B．灭菌是指杀死环境中的一切微生物 的细胞、芽孢和孢子 C．接种环用烧灼的方法灭菌 D．常用灭菌方法有加热法、过滤法、红外线法、化学药品法;1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还有什么目的？;2.无菌范围：;三、实验操作（大肠杆菌的纯化培养）;1．计算、称量 2．溶化 3．调pH：　pH7．6　 4．分装：分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。 5．加塞 6．包扎;包器材;包器材; 7．灭菌: 将装有培养基的三角锥瓶，塞上棉花塞，包上牛皮纸，再放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。将培养皿用旧报纸包裹，放入干热灭菌箱内，在160～170 ℃下灭菌2h。 8．倒平板: 待培养基冷却到50 ℃左右时，在酒精灯附近倒平板。（倒平板操作见课本）2d后观察平板，无杂菌污染才可用来接种. 9．无菌检查： 将灭菌的未接种（或者接种无菌水）的培养基放入37℃的温