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牡丹叶总黄酮抑菌活性研究论文.doc
牡丹叶总黄酮抑菌活性研究论文
唐浩国,单方方,魏晓霞,李叶,刘严,向进乐,徐宝成
【摘要】 目的分别测定了牡丹叶总黄酮提取液、经大孔吸附树脂(D-101、HPD600)和超滤分离后的浓缩液对几种常见微生物的抑菌活性。方法以抑菌圈直径和最低抑菌浓度为指标。结果乙醇提取液对3种细菌的最低抑菌浓度(MIC)分别为:大肠杆菌5.08 mg/ml, 枯草芽胞杆菌2.54 mg/ml.freelg/ml;HPD600大孔吸附树脂分离浓缩液对3种细菌的MIC值分别为:大肠杆菌4.92 mg/ml,枯草芽胞杆菌2.46 mg/ml和沙门氏菌1.23 mg/ml;D-101大孔吸附树脂分离浓缩液对3种细菌的MIC值分别为:大肠杆菌3.13 mg/ml, 枯草芽胞杆菌3.13 mg/ml和沙门氏菌0.39 mg/ml;超滤工艺分离浓缩液对3种细菌的MIC值分别为:大肠杆菌4.048 mg/ml,枯草芽胞杆菌4.048 mg/ml和沙门氏菌1.012 mg/ml。结论牡丹叶总黄酮对3种细菌均有一定的抑制作用,其中对沙门氏菌的抑制作用最为显著。
【关键词】 牡丹叶 总黄酮 抑菌活性 大孔吸附树脂 超滤
Abstract:ObjectiveTo study the antibacterial activity of the extraction solution and concentrated liquid of total flavonoids after separation of the macroporous resin (D-101, HPD600) and ultrafiltration from the leaves of peony. MethodsAntimicrobial circle diameter and minimum inhibitory concentration g / ml, Bacillus subtilis 2.46 mg / ml, Salmonella 1.23 mg / ml; the MIC of the separation of the HPD600 concentrated liquid to the three kinds of bacteria g / ml, Bacillus subtilis 3.13 mg / ml, Salmonella 0.39 mg / ml; The MIC of the separation of the D-101 concentrated liquid to the three kinds of bacteria g / ml, Bacillus subtilis 4.048 mg / ml, Salmonella 1.012 mg / ml; The MIC of the separation of the UF concentrated liquid to the three kinds of bacteria g / ml, Bacillus subtilis 2.46 mg / ml, Salmonella 0.39 mg / ml.ConclusionThe total flavonoids from leaves of peony have a certain effect on the three kinds of bacteria, but the effect of Salmonella is the most notable respectively.
Key l圆底烧瓶中,精密加入25倍量60%的乙醇,在80℃条件下加热回流提取提取3 h,过滤,离心分离,用相应浓度的乙醇定容到100 ml,备用。黄酮纯度为5.27%。
1.1.3 大孔吸附树脂分离纯化牡丹叶总黄酮粗提液将牡丹叶干粉于60%的乙醇、80℃、料液比1∶25的条件下浸提3 h,抽滤,滤液于旋转蒸发器中50℃下减压浓缩至无醇味,回收乙醇。浓缩液用蒸馏水溶解,定容,测定吸光度,计算总黄酮含量,最后取一定量浓缩液再用蒸馏水定容,使其浓度为0.250 mg/ml左右,得稀释液。分别称取预处理好的大孔吸附树脂各8.0 g于250 ml具塞三角瓶中,加入样品溶液240 ml,室温下放置8 h,过滤,滤去树脂,用蒸馏水洗脱,洗至无醇味,再用160 ml的70%的乙醇水溶液进行洗脱6 h,过滤,旋转蒸发浓缩洗脱液,得样液,备用。HPD600得到的黄酮的纯度为15.11%,D-101树脂得到的黄酮纯度为17.60%。
1.1.4 牡丹叶黄酮的超滤分离用切割分子量为10 000 Da,膜面积为50 cm2 的超滤设备进行分离。黄酮纯度为40.58%。
1. 2 培养基的配制普
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