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细胞计数试剂盒
请在使用前仔细阅读本说明书
Cell Counting Kit-8 (CCK-8) 细 胞 计 数 试 剂 盒
—— 细胞增殖实验和细胞毒性实验 (100孔 ，500孔 ，1,000孔 ，3,000孔以及10,000孔的规格)
注意事项：
1. 第一次做实验时，建议先做几个孔摸索接种细胞的数 5. 加 CCK- 8试剂时速度要快，减少试剂在移液器上的
1 5
量和加入CCK- 8试剂后的培养时间。 残留。为使CCK- 8试剂和培养基充分混匀，建议在加
入CCK- 8试剂后轻轻振摇培养板。为了避免加样时由
2. 接种时注意细胞悬液一定要混匀，以避免细胞沉淀下
2
于CCK- 8试剂在枪头上的残留所带来的误差，可以在
来，导致每孔中的细胞数量不等，可以每接种几个孔
加样前用培养基稀释CCK- 8试剂并混匀后加样。
就混匀一下。培养板周围一圈孔培养基容易挥发，为
® ®
了减少误差，建议培养板的四边每孔只加培养基，而 6. CCK- 8试剂中的WST - 8会与还原剂反应生成WST
6
不作为指标检测孔。 - 8甲臜，如果实验中有还原剂，请检查背景的O.D值，
即在不含细胞的培养基中加入药物，然后加入CCK- 8
3. 培养时间根据细胞种类的不同和每孔内细胞数量的多 试剂在一定时间内检测，和不加药物的培养基进行比
3
少而异。一般情况下，白细胞较难染色，因此需要较 较 (只加CCK- 8试剂)，如果O.D值明显偏高，则说明
5
长的培养时间或增加细胞数量 ( ～10 个细胞/孔)。悬 有反应。
浮细胞与贴壁细胞相比较难染色。对于悬浮细胞，在
培养1- 4小时后，可先从培养箱中取出，目察染色程 7. 若细胞培养时间较长，培养基颜色发生变化或pH发生
7
度或用酶标仪测定决定。若染色困难，可将培养板放 变化，建议更换新鲜的培养基后再加CCK- 8试剂。含
回培养箱，继续培养数小时后再确定。染色的最佳时 有酚红的培养基可用于本试剂盒做细胞活性的测定。
间可定为悬浮细胞的最佳培养时间。对于贴壁细胞，
8. 如果样品为高浑浊度的细胞悬液，建议设定600 nm (或
8
培养时间一般为1- 4小时，但在培养30分钟左右即可
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