CRY细胞融合仪使用说明书.DOCVIP

CRY-3型细胞融合仪 使 用 说 明 书 宁波新芝生物科技股份有限公司 地址：宁波国家高新技术区木槿路65号 电话：0574 网址： 传真: 0574 E-mail:zhf@ 一、 概 述 CRY-3型细胞融合仪可广泛应用于农业植物生物工程，细胞杂交，动物医学，微生物的细胞融合及基因导入（电转移）的研究。系统的构成由主机、融合电极室二部分组成。整机全部由数字集成电路加数码显示组成，外形美观，操作方便可靠，是各大专院校、科研机构进行细胞融合教学与科研的理想工具。 二、 原 理 1、细胞融合仪电原理：该机主要由交流（成串）脉冲电压，频率信号发生电路，直流（融合）单脉冲电压发生电路及其它控制电路，检测电路、数显电路等组成。 由交流（成串）脉冲信号发生电路产生的高频交流脉冲(30KHz-3MHz 48vp-p）可使原生质体极化，并迅速排列串珠状。直流（融合）单脉发 生电路可按设定的次数发出脉宽可调的直流高压脉冲(5US-5MS、0-600V) 使融合电极间的电场强度瞬间最高达到6000V/CM。 2、细胞电融合原理 细胞电融合主要是利用一种一定值的频率、电压的交流电场，使处于一定间隔的，平行的两电极间的原生质体排列成串珠状。再利用一定值的高压直流脉冲电场对细胞膜造成可逆击穿，从而诱导相互接触的细胞发生融合。 因为在外加电场的交流脉冲作用下可使细胞极化形成偶极子，相邻的细胞由于静电的吸引会彼此靠拢，同时由于融合室的电极间产生的不均匀电场，使细胞依次向电场强度高的电极部位移动，排列成串珠状这种排列是可逆的，电场消失后，细胞会自行恢复到随机分布状态，在不均匀电场中，细胞膜上所受的压力分布不均匀，导致原生质细胞膜出现局部的可逆击穿，形成微孔。在电场消失后自动闭合，但如果电场强度超过了临界值，则会造成不可逆击穿。 三、 技 术 参 数 1、 成串（交流）电场参数： 成串(方波)脉冲电压：峰一峰值0-48V（0-±24V），连续可调。 成串(方波)脉冲频率：30KHz-3MHZ连续可调。最佳稳定度1.0MHz-2.5MHz） 2、 融合（直流）脉冲参数： 融合（方波）脉冲电压：0-600V连续可调。电极间距1.0mm,融合脉冲电压在600V时，电场强度约6，000V/CM，0.5mm时为1.2万V/CM。融合(方波)脉冲幅宽：5,10,20,40,80,100,150,200μS,1MS,5MS,分十档可任选。融合(方波)脉冲个数：0-9个分十档可任选。闸门时间：短、中、长。 3、 配有微量融合平板电极，极距0.5—1mm。特殊类型的融合电极(如铂丝，镍铬丝电极)可根据用户需要另行加工。 四、仪器面板、后板结构及功能说明 4 7 13 1 2 3 5 6 8 9 图板示意图 14 15 16 ⑴电源开关 ⑵成串（交流）脉冲输出通/断开关，用以控制仪器向融合小室输出成串（交流）脉冲。按下此开关同时再按下⑧开关时才能启动融合小室交流电场，（二只开关指示灯都亮）。 ⑶成串（交流）脉冲电压调节，用以调节交流电场的电压。 ⑷成串（交流）脉冲电压显示，显示电压峰-峰值。 ⑸脉冲触发开关，按下后立即松手仪器即按设定次数输出高压直流脉冲，完成融合过程。 ⑹成串（交流）脉冲频率细调，中调，粗调。 ⑺成串（交流）脉冲频率显示，用以显示交流电场所选择的频率单位为KHZ。 ⑻融合（直流）脉冲输出通/断开关，按下此开关，再按下②开关时仪器的高压脉冲发生电路可与融合小室接通，指示灯亮，此时可施加融合脉冲。 ⑼直流脉冲个数选择开关，可任意选择施加的融合脉冲个数。 ⑽融合（直流）脉冲电压调节钮，设定所需的融合脉冲电压。 ⑾直流脉冲幅宽选择钮，根据需要按刻度选择脉冲持续时间。 ⑿直流脉冲闸门时间选择钮，决定交直流脉冲间隙时间，即在直流脉冲触发后，交流电场自动关闭的时间。 ⒀融合脉冲电压显示，用以显示设定的直流高压脉冲电压。 ⒁电源线插座。 ⒂保险丝（2A）。 ⒃仪器输出插座，（融合小室电极插座） 五、仪器使用说明 操作步骤： ⑴连接电源线插头至⒁。 ⑵插入融合小室电极至⒃，将含有一定密度的动植物细胞融合液加入融合小室内，将融合小室板放至倒置显微镜下，调正光距至细胞清晰。 ⑶按下电源开关① ⑷先调节成串脉冲所需频率（粗、中、细调⑥，然后调节所需成串脉冲电压③（峰-峰值）。 ⑸调节融合脉冲