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牛分枝杆菌主要引起牛结核病,其他家畜、野生反刍动物、人、灵长目动物、犬、猫等肉食动物均可感染。 实验动物中豚鼠、兔有高度敏感性。 对仓鼠、小鼠有中等致病力,对家禽无致病性。 4.微生物学诊断 显微镜检查 取患病器官的结核结节及病变与非病变交界处组织直接涂片,抗酸染色后镜检,如发现红色成丛杆菌时,可做出初步诊断。 分离培养 将病料中加入6% H2SO4或4% NaOH液处理15min后,经中和、离心,取少许沉淀物接种在培养基斜面上,每份病料接4~6管,管口封严,置37℃培养8周,每周观察一次,培养阳性时,需进行培养特性和生化特性鉴定。 动物接种 将上述经处理的供分离培养用的病料接种于动物,皮下或腹腔注射0.5ml, 禽分枝杆菌可使鸡致病;结核杆菌对豚鼠有较强的致病性,皮下注射3~5周可引起明显病变; 牛分枝杆菌对兔有致病性,接种后3周至3个月死亡。 变态反应 临床上最广泛应用的是迟发性变态反应试验,即结核菌素试验,采用PPD皮内注射法, 按我国《动物检疫操作规程》规定,牛颈部皮内注射0.1ml(10万IU/ml)72h后局部炎症反应明显,皮肿胀厚度差≥4mm为阳性; 如局部炎症不明显,皮肿胀厚度差在2~4mm间,为疑似;如无炎症反应,皮肤肿胀厚度差在2mm以下,为阴性。 凡判为疑似反应牛,30d后需复检一次,如仍为疑似,经30~45d再次复检,如仍为疑似可判为阳性。 血清学检查 鉴于结核病细胞免疫与体液免疫的分离现象,抗体阳性意味着病情恶化,正处于感染活动期,检测特异性抗体可诊断结核病。 酶联免疫吸附试验(ELISA)是目前检测抗体的较好方法,决定ELISA特异性的关键是选择结核杆菌特异性诊断抗原。 PCR 广泛应用于于分离菌株及结核病人的临床样本(痰液)的检测,特异性强而且快速。 二、副结核分支杆菌 引起反刍动物慢性消耗性传染病。 1.形态与染色 2.培养及生化特性 3.致病性及毒力因子 4.微生物学诊断:分离培养,变态反应;抗体检测 第8节 螺旋体 猪痢短螺旋体 1.形态与染色:存在2-4个弯曲; 2.培养及生化特性:严格厌氧; 3.致病性及毒力因子:引起猪痢疾,又名血痢、黑痢。 4.微生物学诊断 第9节 支原体 一、鸡毒支原体,又名禽败血支原体。 1.形态与染色 2.培养及生化特性 3.致病性及毒力因子:感染鸡和火鸡, 4.微生物学诊断:难以分离培养。 二、猪肺支原体, 1.形态与染色 2.培养及生化特性 3.致病性及毒力因子:只感染猪,引起猪喘气病。 4.微生物学诊断 三、牛支原体 1.形态与染色 2.培养及生化特性 3.致病性及毒力因子:引起牛传染性胸膜肺炎,又称牛肺疫。 4.微生物学诊断 第10节 真菌 一、白僵菌 引起家蚕的白僵病。 1.生长发育周期及形态特征 2.白僵菌的代谢产物 3.分生孢子的生存力与抵抗力 二、蜜蜂球囊菌变种(蜜蜂病原) 谢 谢 电话Email:vszw@njau.edu.cn * 胞内菌的基本概念 根据病原菌与宿主细胞的关系,病原菌分为胞外菌和胞内菌两类。 胞外菌是指可以在宿主细胞外的细胞间隙、血液、淋巴液、组织液等体液中生长繁殖的细菌。 胞内菌又分两种,即兼性胞内菌和专性胞内菌。兼性胞内菌是指在宿主体内,主要寄居在细胞内生长繁殖,在体外无活细胞的培养基中亦可生长。专性胞内菌则不论在体内体外,都必须在活细胞内生长繁殖 一、布氏杆菌属:布氏杆菌 有羊、牛、猪、鼠、绵羊和犬6个种,20个生物型。 是引起多种动物和人发病的病原。 1.形态与染色 球杆状,无鞭毛,不形成芽孢。 革兰氏阴性。 2.培养及生化特性 此属细菌专性需氧,但许多菌株,尤其是在初代分离培养时尚需5%-10% CO2。最适生长温度37℃,最适pH为6.6-7.4。 泛酸钙和内消旋赤藓糖醇可刺激某些菌株生长。 大多数菌株在初次培养时生长缓慢,在48h内罕见形成菌落,常需5-10d甚至20-30d,但实验室长期传代保存的菌株,培养48-72h即可生长良好。 普通培养基上生长缓慢;在含有3~5%的甘油或血液、血清、葡萄糖的培养基中生长更好; 菌落特点 甘油琼脂:细小、光滑、圆形、湿润、粘稠的灰白色渐至灰黄色菌落 血琼脂:不溶血 马铃薯培养基:蜂蜜状粘稠菌苔,颜色由淡黄色→淡褐色→深褐色;对鉴定有价值 孔雀绿酸性复红培养基上,形成淡绿色菌落 麦康凯上不能生长 在液体培养基中呈轻微浑浊生长,无菌膜。 但培养日久,可形成菌环,有时形成厚的菌膜;在固体培养基上,菌落可以分为 光滑(S)型菌落 粗糙(R)型菌落 粘胶状的粘液(M)型菌落 3致病性和毒力因子 将本属分为该属现包括6个种20个生物型, 马尔他布氏杆菌(Br.melitensis)生物型1~3、 流产布氏杆菌(Br
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