第十三章 各种实验操作.docVIP

实验题目：光学显微镜技术 实验类型：基本技术 学 时：6 一、实验目的 了解体式显微镜、生物显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光倒置显微镜和干涉差显微镜的构造原理，并掌握其使用方法。 二、试剂和器材 体式显微镜、生物显微镜、暗视野显微镜、相差显微镜、荧光倒置显微镜、干涉差显微镜、载玻片、盖玻片、乙醇、香柏油、二甲苯、滤纸条、醋酸、磷酸二氢钾、染色缸、永久制片等。 三、实验内容 1.体视显微镜的构造与使用方法 2.生物显微镜的构造与使用方法 3.暗视野显微镜的构造与使用方法 4.相差显微镜的构造与使用方法 5.荧光倒置显微镜的构造与使用方法 6.干涉差显微镜的构造与使用方法 四、关键步骤与注意事项 1. 镜头上更多的较顽固的污迹要用干净的软棉布，镜头纸或纱布蘸上无水乙醇或甲醇轻轻地擦去。 2. 从油镜上擦去浸油，应使用镜头纸、软棉布或纱布，蘸上二甲苯轻轻擦去。 3. 使用100X物镜时，标本与物镜之间充满显微镜用油；用40X、100X甘油荧光镜时，应在物镜与标本之间充满甘油。 五、思考题 　　　 1.物镜的种类各具有何种特点? 2.柯勒照明法及其实质? 3.显微镜的各种能力之间有何关系? 4.为什么暗视野照明的视场暗黑，样品影像明亮? 5.使用暗视野照明时，为什么必须在聚光器与载玻片间进行油浸? 6.如何进行暗视野聚光器的调中和聚焦? 7.相差显微镜有哪些特有的附件，其构造如何? 8.为什么相差显微镜可以直接观察活体样品? 9.干涉显微镜适用观察哪种标本? 10.荧光显微镜为什么要以汞灯当光源? 11.激发滤片和阻断滤片的功能及其区别? 实验题目：离心技术 实验类型：基本技术　 学　时： 4 一、仪器设备 低速离心机、低速冷冻离心机、高速离心机、高速冷冻离心机、落地式大容量冷冻离心机。 二、仪器结构 略 三、原 理 在离心力场的作用下，加速悬浮液中固体颗粒沉降（或漂浮）速度。 四、适用范围 微生物菌体、大分子蛋白质、酶反应液或各种提取液，常常是由固相（固形物）与液相组成的悬浮液。 五、操作方法 1、 接通离心机电源，打开机器开关，等待机器自检完毕； 2、 按open键（机器电子锁开），打开机器盖； 3、 根据使用需要选择合适的转子，将转子轻轻地套在旋转轴上，用六角螺丝刀旋转转子上的螺母，将转子固定。 4、 根据转子选择适合的离心管，将样品装入一对离心管后，在托盘天平上调节使它们质量相等，然后对称的放入转子中，先将转子的盖子旋紧，然后盖上机器盖。 5、 根据需要依次设置离心所需要的温度、运行程序（可不选择）、转速、离心时间（当触及某一项的按键时，显示屏上相对应的值会闪烁，设完一个参数可直接触及下一个按键，继续设定所需数值），设置结束后按“start/stop”开始运行机器。 6、 离心结束后，转子会逐渐地停下来，“open”键指示灯亮起，按此键打开离心室，旋开转子盖，取出样品。 7、 将离心管处理干净，倒置在小张滤纸上使其干燥，以便下次使用。旋上转子盖，关上机盖。若离心室内壁有冰霜待其化净干燥后，再旋上转子盖，关上机盖。 六、注意事项 1、? 离心机移动后，最好4小时后再使用。转子长期不使用，应取出。使用时在旋转上涂抹润滑油。 2、 使用离心机时对称放置离心管，且质量相等。机器运行前检查转子盖、机器盖是否盖好。 七、思考题 1、离心机适用范围如何？ 2、使用离心机时应该注意哪些？ 实验题目：光谱分析技术 实验类型：基本技术 　 学 时：6 一、仪器设备 721、723可见分光光度计、752紫外可见分光光度计、UV－2401PC紫外可见分光光度计、UV－3150PC紫外可见近红外分光光度计、RF-5301PC荧光分光光度计、比色液及标准溶液、滤纸等。 二、仪器结构 略 三、原　　理 光谱仪器是一种简单易用的分光光度法测定通用仪器，不同型号的机器测定的波长范围不同，可以根据自己的需要选择要使用的仪器。 不同型号的光谱仪器的构造有很大的差别，但是其基本原理是相同的。根据溶液中各种成分对透过光的吸光度不同，在一定范围内，吸光值（或者透过率）与溶质的浓度成正比（玻尔定律）。通过准确浓度的标准品对应其吸光值（透过率）作图，可以得到一条标准曲线。测定未知浓度的待测样品的吸光值（透过率），与标准曲线相比较就可以得到其浓度。 四、适用范围 可广泛用于医学卫生、临床检测、生物化学、石油化工、环保检测、质量控制等方面作定量、定性分析。 具体可以对多糖、蛋白、