益生菌基因组DNA免疫佐剂的研究.pdfVIP

摘 要 摘 要 高致病性禽流感病毒(AvianInfluenza 后重挫全球经济，威胁公众健康。AIVH5N1的高致病性和高变异性给疫苗的研制和应用 带来极大的困难。为此，研制能够提高宿主整体免疫力、抵御交叉感染和延长保护时间 的禽流感疫苗佐剂显得相当有意义。益生菌基因组DNA作为新型核酸佐剂具有提高疫苗 效力的潜力，因此有着巨大的研发价值。 本研究选用多种益生菌，提取其基因组DNA作为AIVH5N1油乳苗的佐剂，并首次比 较致病菌基因组DNA和人工合成的CpG寡聚核苷酸(CpGODN)的免疫佐剂性。分不同剂 量、不同免疫途径从体液免疫、细胞免疫、细胞因子分泌等多方面探讨其作为免疫佐剂 的效果，以期找到能够较好提高AIVH5N1油乳苗效力的核酸佐剂及其递呈方式。实验结 果表明：无论是益生菌基因组DNA(粪链球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽孢杆菌、双歧杆菌、 屎链球菌)，致病菌基因组DNA(革兰氏阴性菌大肠杆菌和革兰氏阳性金黄色葡萄球菌)， 还是合成的CpG ODN 油裹于AIV油乳苗内后再行注射免疫时，CpG 效价和血清IFN．丫浓度，而降低血清IL一10浓度，其中CpGODN免疫佐剂性较FQ68基因组 明显，而致病菌大肠杆菌和金黄色葡萄球菌基因组DNA对AIV油乳苗的免疫佐剂性较差。 结论显示，基于核酸佐剂和疫苗在动物体内递呈方式的差异所导致免疫效果的不同：如 果核酸佐剂在免疫时游离于疫苗抗原，其表现出的免疫佐剂性较差，而当核酸佐剂油裹 ODN和益生菌基因组DNA均能提高体液和Thl型免疫应答水平， 于油乳苗内再行免疫，CpG 且CpG 鸡上也能诱导Thl型免疫应答，改变了传统疫苗诱导机体应答方式的初步结论。 关键词： CpGODN，细菌基因组，禽流感病毒H5N1灭活油乳苗，佐剂，免疫途径，免 疫应答，lhl型免疫应答 Abstract Abstract The AvianInfluenza 1 fallthe highlypathogenic Virus(AIV)H5Nsubtypeseriously andthreatenedthehumanhealthsinceitbrokeoutin in1997． globaleconomy HongKong The and ofAIVH5N1 raisedthe high highvariability difficultiesofAIV pathogenicity vaccine RDand studiesonthevaccine withthe of ’ application．So adjuvant capability thehostwhole thecrossinfectionand the enhancing immunity，resisting extendingprotective AIVH5N1 wouldbe thenovelnucleotide phaseagainst quitemeaningful．As adjuvant， DNAha