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甘草甜素对人膀胱癌细胞T24的抑制作用及其机制研究论文

录 ..............................................................................1 ...............................................................................:; 甘草甜素对人膀胱癌细胞T24的抑制作用及其机制研究 ........................................................................................6 材料与方法……………………………...……………………………6 结果 ……………………………………………………………………12 附图 ……………………………………………………………………14 附表………………………………………………………………….:.19 讨论……………………………………………………………………20 参考文献……………………………………………………………..25 综述膀胱肿瘤标志物的研究进展………………………………………..29 致{射………………………………………………………………..:………39 个人简历……………………………………………………………………40 中文摘要 甘草甜素对人膀胱癌细胞T24的抑制作用及其机制研究 摘 要 背景及目的:膀胱癌是泌尿系统常见恶性的肿瘤。膀胱移行细胞癌常 取手术治疗,术后辅以药物化疗。然而,目前的术后化疗药物的疗效不 理想,.保留膀胱的患者,两年内超过半数肿瘤要复发,并且有10%.15% 有恶性程度增加趋势,寻找高效低毒的药物对提高膀胱肿瘤治疗具有积 意义。因此,发现并开发新型抗肿瘤药物仍然是医学界所必须面对的十 分艰巨而长期的使命与挑战。 中医药在治疗、康复、养生等方面具有独特的优势,但在防治膀胱肿 甘草中分离出来的三萜类成分,具有较为广泛的抗瘤活性,能抑制乳腺癌、 肝癌及前列腺癌等细胞生长。还未见有对膀胱肿瘤抑制作用的报道。本研 究观察了甘草甜素对膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的作用并对其作用机制 进行了探究。为甘草甜素作为抗肿瘤药物临床应用提供实验依据。 方法: 1体外培养膀胱癌I24细胞,观察甘草甜素处理后的量效、时效关系。 jaxnol/L), 处理不同时间(24、48和72h)后,光镜下观察甘草甜素对T24细胞形 态学变化。运用四甲基偶氮唑蓝法(MTT)对不同浓度甘草甜素作用不 同时间后T24细胞增殖的抑制作用进行研究。 小时的T24细胞,碘化丙啶(PI)染色后经细胞流式细胞仪检测膀胱癌 T24周期、凋亡的影响。 3采用Western Bcl.2、Bax蛋白表达的影响。 结果: 1甘草甜素抑制T24细胞增殖 不同浓度的甘草甜素作用T24细胞24h后,光镜下可见细胞体积缩 小,悬浮细胞增多,细胞变小、变圆、皱缩,核固缩破碎,排列松散或聚 中文摘要 集成团,细胞内颗粒增多,培养液中细胞碎片增多。MTT检测结果显示, 甘草甜素能以浓度依赖的方式抑制T24细胞的增殖。且通过LSD-t检验 发现甘草甜素对T24细胞增殖的抑制作用具有时间和剂量关系。 .2甘草甜素可诱导T24细胞周期阻滞和细胞凋亡 流式细胞术检测结果显示,甘草甜素作用48 400 亡。 3甘草甜素可明显下调T24细胞PCNA蛋白的表达 Western blot检测结果显示经甘草甜素(50、100、200、400 Ixmol/L) 度的增高,PCNA蛋白表达量逐渐下降,呈剂量依赖性。 表达 Western

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