ABI+Prism7000+中文操作手册.pdfVIP

美国应用生物系统公司 ® ABI Prism 7000 型荧光定量 PCR 仪 操作手册 快速入门指南 ABI Prism® 7000 中文操作手册 目 录 一. 开 机 3 二. 实时定量的软件运行 3 1. 新建文件 3 2. 探针设置 4 3. 填样品表 4 4. 参比荧光 5 5. 循环参数 5 6. 启动扩增 5 三. 实时定量的数据分析 6 1. 数据分析 6 2. 基线设定 6 3. 线性图谱 6 4. 原始数据 7 5. 标准曲线 7 6. 实验报告 7 四. 终点读板的软件运行 7 1. 新建文件 8 2. 探针(DETECTOR)设置 8 3. 位点(MARKER)设置 8 4. 填样品表 8 5. 参比荧光 8 6. 终点读板 9 五. 终点读板的数据分析 9 1. 数据分析 9 2. 信号分布 9 3. 基因分型 9 4. 保存结果 9 六. 日常维护 10 1. 荧光污染的检查与处理 10 2. 检测器光源的更换流程 10 2 ABI Prism® 7000 中文操作手册 ABI Prism® 7000 型荧光定量PCR 仪 快速入门指南 一. 开 机 1. 确认电脑与主机的数据通讯线(灰色 USB 连线)连接正确。 2. 确认电脑处于外接电源供电状态。 3. 启动电脑，以 Administrator 用户名登录，进入 Windows2000 操作系统。 4. 待桌面图标出现后，打开 7000 主机的电源。 5. 待主机的电源指示灯点亮后，启动 7000 SDS 应用软件。 在进行实验之前，请先检查样品加热模块以确定它没有受到荧光污染，具体方法请 按照第 6 节的“荧光污染的检查与处理”流程进行。 二. 实时定量的软件运行 基因表达的绝对定量和相对定量研究、转基因食品的检测(GMO)、各种病原体的检 验检疫等各种定量应用；以 CT 值的大小作为样品阴性、阳性判定依据的定性应用；以 及 SNP 检测、等位基因鉴定实验等的第一步 PCR 扩增，都是采用实时定量模式，按照 以下步骤操作。 1. 新建文件 菜单File → New ，Assay选择Absolute Quantification (实时定量模式)， 打开一个空白的 96 孔板文件。 3 ABI Prism® 7000 中文操作手册 2. 探针设置 双击任意一个孔，打开Well Inspector窗口。该窗口也可以从菜单 View → Well Inspector打开。 3. 首次使用软件，或者探针（Detector）没有设置好，请点击Add Detector按钮，打开 Detector Manager窗口。该窗口也可以从菜单Tools → Detector Manager打开。如 果Detector列表中没有合适的探针，点击按钮File → New，新建探针：设定探针的 名称(建议使用所研究基因符号，如GAPDH、ACTIN等)、报告基团(FAM或者VIC) 、 淬灭