4调节鱼藤酮介导的嗜铬细胞瘤细胞损伤.pdfVIP

史垡控经型苤壶!Q塑堡!!旦墓丝鲞笠!!翅堡蝤!!盟!婴堂：型!竖畦坚!Q堕：!!!：丝。盥!：!! ·771· ．基础研究 细胞外信号调节激酶参与调节鱼藤酮介导的 嗜铬细胞瘤细胞损伤 王洪财张振涛王涛 曹学兵孙圣刚 【摘要】 目的探讨细胞外信号调节激酶(extracellularsis,1a1．regulatedkinase，ERK)1／2在鱼藤 酮介导的多巴胺能细胞损伤中的信号调节机制。方法鱼藤酮处理体外培养的大鼠肾上腺嗜铬细胞 瘤(PCI2)细胞株，建立帕金森病细胞模型。采用二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(M1Tr)比色法检测鱼藤 酮对PCI2细胞活力的影响，免疫组织化学方法观察鱼藤酮对磷酸化ERKI／2(p-ERKI／2)表达的影 响，免疫印迹法研究P—ERKI／2蛋白表达随时间变化的趋势，并检测ERKl／2上游激酶抑制剂 PD98059对鱼藤酮诱导ERKI／2磷酸化及细胞活力的影响。结果PCI2细胞随鱼藤酮(5 I^mol／L) 作用时间的增加，细胞吸光度(％)出现下降，1h降至对照组的75．46±5．47，2、4、8h分别降至 70．42±1．94、65．23±0．96、59．04-t-2．85，24h降至29．64±1．63，各时间点差异有统计学意义(F= 均P0．Ol。镜下观察显示鱼藤酮处理的细胞中有明显P-ERKI／2聚集；免疫印迹实验结果显示，随 min开始升高，1—2h达高峰，4h转而降 鱼藤酮作用时间的增加，P-ERKI／2出现双相表达升高，30 低，8h又重新升高，16h后基本消失；PD98059明显抑制鱼藤酮导致的ERKl／2磷酸化，明显减低了 细胞损伤的程度。结论在鱼藤酮介导的多巴胺神经元损伤中呈现ERKl／2双相活化，该过程可能 在调控PD多巴胺能细胞损伤中起重要作用。 【关键词】PCI2细胞；帕金森病；丝裂原活化蛋白激酶3；鱼藤酮 Extracellular kinases1 and2 rotenone··inducedin signal-regulated regulating injury cells pheochromocytomaWANGⅣDng—cai，ZHANGZhen—too，WANGTao，CAOXue—bing，SUNSheng- Medical and gang．DepartmentofNeurology，UnionHospital，TongjiCollege，HuazhongUniversityofScience Technology．Wuhan43∞22．China author：WANG Corresponding Tao．Email：wangtaowh@yahoo．仉 To theroleoftheextracellular kinasesland2 【Abstract】0bjecflveinvestigate signal-regulated ifl rotenone—reediated cell Neuronalrat adrenal (ERKI／2) dopaminergieda衄雄re．Methotis treatedwithrotenonewereused够thecellmodeIofParkinson’8dise鹏e pheochromocytoma(PCI2)cells ofPCI2cellsafter torotenoneW8detected (PD)．CeⅡviability exposure byMTI(methylthiazolyl