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基因工程Jily 名词解释 生物技术:是指在细胞水平上,特别是在分子水平上对生物体体性实现巨大的接近定向改造的一套内容繁多和复杂的技术。包括基因工程、细胞工程、本科工程、发酵工程等。 基因工程:指按照设计好的蓝图,利用现代分子生物学技术,特别是酶学技术,对遗传物质DNA直接进行体外重组操作与改造,将一种生物的基因转移到另外一种生物受体中去,从而实现受体生物的定向改造与改良。 植物基因工程:用人工的方法,从不同生物中提取外源基因片段及载体DNA,经过体外切割、拼接和重组,然后采取某种方法,把重组后的带有外源基因的载体DNA引入植物细胞,并使其在植物细胞内进行复制和表达,以达到预期的改变受体植物细胞遗传特性的目的。 遗传工程:人工改造生物体遗传性的技术。包括细胞工程、染色体工程、细胞器工程、基因工程等 。 载体:在基因工程操作中,把能携带外源DNA进入受体细胞的DNA分子叫载体。 质粒:染色体外能自我复制的小型DNA分子,是基因工程中最常用的载体。 YAC:酵母人工染色体载体,它由端粒序列 、着丝粒 、自主复制序列、SUP-4(外源DNA插入失活的选择标记)、URA3和TRP1组成。YAC可容纳的DNA片段可达106,用来构建高等真核生物基因文库。 受体细胞:是指在转化和转导(感染)中接受外源基因的宿主细胞。 转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内维持稳定并表达的过程。 感受态细胞:理化方法诱导细胞,使其处于最适摄取和容纳外来DNA的生理状态。 工具酶:基因工程中进行基因的剪切、拼接、组合所需的酶统称为工具酶。 退火(复性):温度降至温度降至55℃左右,引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。 基因组文库:含有某种生物全部遗传信息的重组DNA分子的克隆总和。 cDNA文库:从一定生长阶段或条件的某种细胞分离到的全部mRNA经反转录成cDNA后再重组和增殖所产生的无性繁殖的总和。 DNA甲基化:是最早发现的修饰途径之一,能引起染色质结构、DNA构象、DNA稳定性及DNA与蛋白质相互作用方式的改变,从而控制基因表达。 RAPD:全名随机扩增多态性DNA,建立在PCR基础之上的一种可对整个未知序列的基因组进行多态性分析的分子技术。利用一系列单个随机引物(通常为10个核苷酸),以基因组DNA为模板进行扩增。 RFLP:限制性片段长度多态性,指应用特定的核酸内切酶切割有关的DNA分子所产生的DNA片段在长度上的变化。 SSR:简单重复序列多态性,也叫微卫星标记,其串联重复的核心序列为2-6 bp,多态性片段长度约100-300bp。 AFLP:扩增片段长度多态性,它结合了RFLP和PCR技术特点,是基于PCR技术扩增基因组DNA限制性片段,基因组DNA先用限制性内切酶切割,然后将双链接头连接到DNA片段的末端,接头序列和相邻的限制性位点序列,作为引物结合位点。 PCR:聚合酶链式反应,模拟体内DNA复制条件,应用DNA聚合酶反应,特异性扩增某一DNA片段的技术。 探针:指经放射性或非放射性等物质标记的已知或特定的DNA或RNA序列。 基因芯片:通过微阵列技术将高密度DNA片段阵列通过高速机器人或在位合成方式以一定的顺序或排列方式使其附着在如玻璃片或硅征等固相表面,以荧光标记的DNA探针,借助碱基互补杂交原理,进行大量的基因表达及监测等方面研究的必威体育精装版革命性技术。 基因治疗:是指将人的正常基因或有治疗作用的基因通过一定方式导入人体靶细胞以纠正基因的缺陷或者发挥治疗作用(也包括剔除或抑制某些导致疾病的基因),从而达到治疗疾病目的的生物医学新技术。 基因打靶:是指通过DNA定点同源重组,改变基因组中的某一特定基因,从而在生物活体内研究此基因的功能。 基因疗法:利用健康的基因来填补或替代基因疾病中某些缺失或病变的基因。 核酸分子杂交:具有互补序列的两条核酸单链在一定条件下,按碱基配对原则形成双链的过程。 原位杂交:将标记的核酸探针与细胞或组织中的核酸进行杂交,称为原位杂交。 分子标记:是以个体间遗传物质内核苷酸序列变异为基础的遗传标记,是 DNA 水平遗传多态性的直接反映。 简答题 1.质粒作为理想的基因工程载体应具备哪些特点? (1)一个复制起点 (2)可选择的标记,是鉴定细胞是否携带载体所必需的。 (3)合成的单一限制酶酶切位点 (4)插入标记,是用来观察外源基因是否插入。 (5)合适的大小,质粒应该相对的小,小质粒不易受物理损伤,而且限制酶的(6)酶切图谱较简单,另外,小质粒一般具有较高的拷贝数。 (6)高拷贝数,基因工程应该选择具有高拷贝数的松弛型的质粒为载体。不同的质粒有不同的拷贝数 (7)不易丢失 2.在提取DNA的过程中,用无水乙醇和异丙醇均可沉淀DNA有什么区别? 在提取DNA的过程中,利用无水乙醇和异丙醇均可沉淀DNA,但

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