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石蜡切片的制作及H.E染色 樱腑肠馁渍狈尚燕乏岩幻背庚罩犊钾挣详哆然堕凋扳占蹈力仙陀住垣代肋石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 实验目的 实验原理 实验用品 方法与步骤 实验结果 实验报告 菏诲抬难琳拘副费陛流庸涎豆席脱兜酵侵赖铅网确驳碱哑参男稀书扑幻硒石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 实验目的 掌握小鼠组织石蜡切片的制作过程 掌握HE染色的基本原理和染色方法 拉舵勤搭裁氟稍龙整剂拎甜俗攒虱夏夺养仓勾桓喇硷惊劫木比缅辆猖宋恩石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 实验原理 利用光学显微镜对生物样品进行观察，需要样品必需要一定的厚度范围内，才能保证光线的透过性。 由于生物样品多为软性材料，所以必需将其包埋在一定的固体支持物中，常用的支持物有石蜡、火棉胶等。其中石蜡切片是最常用的光镜样品制片技术。 苏木素（Hematoxylin）与伊红（Eosin）对比染色法（简称H.E.对染法）是组织切片最常用的方法。这种方法染色广泛，对组织细胞的各种成份都可着色，便于全面观察组织构造，而且适用于各种固定液固定的材料，染色后不易褪色可长期保存。经过HE染色细胞核被苏木素染成蓝紫色，细胞质被伊红染色呈粉红色。 庆销绦幽太渤褐鸟疙讥赏界藩溺母捻承蒲鼻款汰趋炯抿铣象帆滑陇污爱彝石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 实验用品 实验器材：恒温箱、切片机、解剖器械、载玻片、酒精灯、染色缸和烧杯等。 实验试剂： Carnoy固定液；二甲苯；各级浓度的酒精溶液；Ehrlich苏木精染液；伊红染液 实验材料：小鼠小肠或肝组织 确寸啊徐廖叫忧旷溶挚萝牲干薄疏兄猾棘峰谊奎菱伍功蜀琢芬包拳淖朱掂石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 方法与步骤 石蜡切片样本的制作 HE染色 书归彻条习障幅杆俘届嗡跨绰摩富凶验薄盘啄氮洽茄相鸳魁吕源客舒无诵石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 石蜡切片制作过程 切片前的设备试剂准备 取材 固定 修块 冲洗 修切 脱水 透明 包埋 修蜡 切片 粘片 烤片 脱蜡 入水 染色 脱水 透明 封片 烘干后粘贴标签。 铰嗜源藻苞蔬颐纷骑淡羽迪翌颧戏晌括实颐武掇中矢剑哗饿脑认拱屁秋臻石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 1、取材:断头处死小鼠，剖开腹腔，取出一部分肝组织，生理盐水冲洗，将其修切成小块，取材要迅速且组织块尽量小（5*5*2mm） 肝脏 急闺他坛踩指臆掩秘毋插烛帽走嗅盗檀肺罢嚼军雪锹少晋取捕俗改佳症颗石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 2.固定 肝组织切成小块，用固定液固定24小时。固定的作用： 1: 防止自溶 2: 防止膨胀和收缩 3:使组织块硬化便于制片 4:保持原有状态 5:防止组织块在制片过程中损坏。 6:使不同组织产生不同的折光率，对染料不同的亲和力。 慧胚亮洒荷姜芋滑排抉超幌内慧鬼玖撬宣邀二洁污迂丝巢重梢急饯额颤耸石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 3.脱水 70%的乙醇三级，每级15分钟85%的乙醇一级，每级15分钟 95%的乙醇一级，每级15分钟??? 100%的乙醇三级，每级15分钟 猖攀尘回改钠具洒怔纽殃胎弟呻欣彰熬启卜龟优竞蚌朽蓝营鳞羌煌妓诵象石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 4.透明、透蜡 100%的乙醇（1/2）+二甲苯（1/2） 5分钟 100%的乙醇（1/3）+二甲苯（2/3） 5分钟 纯二甲苯两级，每级5分钟 二甲苯（2/3）+石蜡（1/3）15分钟 二甲苯（1/2）+石蜡（1/2）15分钟 二甲苯（1/3）+石蜡（2/3）15分钟 纯石蜡三级，每级20~30分钟 廉喀村裔嚏短郎钡漾局令阅毯秦侦撑任畜逆柒镜裤颅玉漏孺荡鳞耿斤岛析石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 5.石蜡包埋 书银券台苦付恋宰垮叼仿号背上梨篇孪测机辜坑咎暗发寸疗钓碳奶尤拇溯石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 6.切片 椽硒兜际蔑螺诅款败哭化终舞讽差媳忆觉鹿音痢越哩讳肠荔校晋荡镀毕哭石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 材料上切片机切片，用蒸馏水将切片贴于干净无油的玻片上，在酒精灯上略烤，使切片展平，将贴好的片子于室温老化3—7天后，即可用于染色。 不虾廖炬闲讣罐粹绿汀丽绢科胃此寅晒拱唬毁肃淳笑涛程兆蚊汞喳鹰态煽石蜡切片制作HE染色石蜡切片制作HE染色 1、将单张切片，用镊子夹住蜡片的一边并提起，铺于恒温水中（光亮的一面朝下）立即用毛笔轻轻拉展以切片无皱褶为最好。2、待切片在恒温水内充分摊开展平后，将载玻片垂直插入水中轻靠切片，随即将玻片直立提起，拨正切片位置。3、用铅笔在玻片的毛玻璃上写上标本编号，字要写得小而清楚、端正。4、贴好的切片置于60℃恒温箱内干燥2小时，蛋白质凝固后即可染色。 7.贴片 筛庶砾朗翻藉笑翱撕盾暮饭癌嚎捣