第十一章吸光光度法5.pptVIP

入射光波长 1)通常选择lmax:灵敏度高,减小或消除单色光的不纯引起的对朗伯比尔定律的偏离. 2) lmax处有干扰时,选择干扰最小,吸光度尽可能大的波长进行测量. 5.3 吸光度读数范围的选择 任何型号的分光光度计均有一定的读数误差,这是由于光源不稳定,读数不准确等因素造成的. 一定型号的分光光度计透光度读数误差是一常数.（? 0.2 %～ ? 2 %） 在不同的透光度读数范围内引起的浓度相对误差是不同的. 由Lambert-Beer定律可推导出浓度相对误差公式. 内 容 选 择 一、概述 二、光的吸收定律 三、分光光度计 四、显色反应和显色条件的选择 五、吸光度测量条件的选择 六、吸光光度法的应用 * 上一页 下一页 本章目录 * 5 测定条件的选择 5.1、选择合适波长的入射光。 （545nm） 原则：使溶液的吸光度能真正反映待测物的浓度。 在吸光度测量中，作为比较的溶液或溶剂称为参比溶液或空白溶液。 在测定时用空白溶液调节仪器A=0(T =100%) ,以消除溶液中其它物质的干扰,抵消比色皿对光反射、吸收. 5.2选择适当的参比溶液。 (1) 试样、试剂、显色剂都无色时，用纯水作参比。 (2) 试样无色，试剂、显色剂有色，采用不加试样的空白溶液作参比。√（试剂空白） (3)试样有吸收，而显色剂等无色，可采用不加显色剂的试样为参比。（试液空白） (4)均有色，有吸收，对试样加入掩蔽剂，褪色后再加显色剂等作为参比。(褪色空白) 透光率读数的准确度是仪器精度的主要指标。测定结果的精度常用浓度的相对误差dc/c表示。 若透光率刻度的读数的绝对误差为?T=1%，用不同的T代入上式，可得相应浓度测量的相对误差?c/c，作图，p323图11-7. 1、T在20%～65% (A=0.19～0.70)范围，相对误差较小。 2、T = 36.8%(A =0.434)，相对误差最小。 由图可见： 为了减小浓度的相对误差，提高测定的准确度，一般应控制溶液吸光度A在最适宜读数范围0.20～0.70。 0.2 0.4 0.6 0.8 1.0 0 2 4 6 8 10 T 0.368 【例】某一有色溶液在2.0cm的吸收皿中，测得透光率T＝1％，若仪器透光度的绝对误差△T＝0.5％，计算 （1）测定的浓度的相对误差△c/c （2）为使测得吸光度在最适读数范围内，溶液应稀释或浓缩多少倍？ （3）若浓度不变，而改变比色皿厚度（0.5cm, 1.0cm，2.0cm,3.0cm）,则应选择那种厚度的吸收皿最合适，此时△c/c为多少？ 解 （1） （2）A=-lgT=-lg1%=2 设有色溶液原始浓度为co，当b一定时，A＝εbc＝K?c，要使A＝0.2～0.7，则 即稀释3～10倍 （3）当c一定时即co，A＝εbc＝K?b,要使A＝0.2～0.7，则 bo=2cm b=0.5cm 控制吸光度在适宜的范围内(A=0.20～0.70) (1) 控制试样的量或溶液的稀释程度来控制溶液浓度。 (2) 选择不同厚度的比色皿。