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血管平滑肌细胞增殖与Cdk抑制蛋白p27的表达
生理学报 , 1999 年 6 月 , 51 (3) , 285～290 285 Acta Physiologica Sinica 血管平滑肌细胞增殖 与 Cdk 抑制蛋白 p27 的表达3 袁 勇 许顶立 刘伊丽 贾满盈 (第一军医大学南方医院心内科 , 广州 510515) ( ) 摘 要 p27 蛋白是细胞周期素依赖性激酶 Cdk 抑制蛋白家族中的一种 , 主要对外部促进 ( ) 或抑制细胞增殖的信号起反应。本研究应用流式细胞仪 FCM 双标记的方法观察血管紧张素 Ⅱ ( ) ( ) ( ) ( ) Ang Ⅱ 、血管加压素 AVP 和血小板源生长因子 PDGF 对血管平滑肌细胞 VSMCs 细胞周期 百分比和p27 蛋白表达量的影响。静止状态培养的VSMCs 加入 Ang Ⅱ, AVP , PDGF2BB 后 , 在不 ( ) 同时间收集细胞 , 用碘化丙啶 PI 标记细胞 DNA , 以确定细胞所处的周期。用p27 蛋白的单抗 和标记了 FITC 的二抗标记细胞 , 通过流式细胞仪测定被激发出的荧光量来确定细胞 p27 蛋白 表达的相对量。结果显示 , Ang Ⅱ刺激VSMCs 增生 , 其蛋白含量增加了4316 % ( P 0101) , 但不 ( 抑制p27 蛋白的表达 ; AVP 可轻度抑制p27 的表达 , 有轻度促进VSMCs 增殖和增生的作用 P 0105) ; PDGF 明显抑制p27 的表达 , 引起细胞增殖。本研究结果提示 , p27 蛋白抑制VSMCs 通过 G 期进入 S 期 , 是抑制 VSMCs 增殖的重要调节因子。 1 关键词 : p27 蛋白 ; 细胞周期 ; 血管平滑肌细胞 ; 流式细胞仪 学科分类号 : R54315 ( ) 血管平滑肌细胞 VSMCs 的增殖和增生是动脉粥样硬化、高血压、冠状动脉腔内成型 术术后再狭窄的主要病理表现 , 引起VSMCs 增殖或增生的信号转导机制目前尚不完全清 楚 , 但揭示 VSMCs 增生或增殖的信号转导通路具有重要意义[1 ] 。 VSMCs 增生或增殖的早期信号转导通路是相似的 , 例如 : Ca2 + , PKC , 酪氨酸激酶 , Ras , Raf , MAPK, 因而弄清下游两条信号转导通路的区别是非常重要的[2 ] 。在细胞周期 ( ) [3 ] G 末期存在一个限制点 restriction point , R 点 , 细胞能否越过它是细胞增殖的关键 , 后 1 ( ) ( ) 者是由 G 期的细胞周期素 cyclin 和细胞周期素依赖性激酶 Cdk
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