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检定菌传代、贮存、接种操纵规程
目 的：建立检定菌的传代、贮存、接种操作规程。适用范围：适用于本厂检定菌的传代、贮存、接种。责 任 人：QC微生物检验人员对本规程的实施负责。依 据：《中国药典》2005年版。内 容：1 检定菌种由药检部门提供已接种好的菌种斜面。2 将传代并经过培养后的菌种放入冰箱内保存。3 每只保存菌种需标明菌名、接种日期。4 传代和接种4.1 试验用菌种每2～3月传代一次。4.2 先点燃酒精灯，在火焰旁的上部空间操作，烧灼接种环。4.3 再将原有的菌种管与接种管，持在左手拇指、食指及中指之间，要注意能清楚地观察到斜面，菌种管在前，接种管在后。应斜持试管呈45○角，使试管内斜面向上，两试管口平齐，注意不要持成水平，以免管底凝集水浸湿培养基表面。4.4 首先，以右手在火焰旁转动两管的棉塞，以便接种时易于拔取。再以右手持接种环的柄端，垂直或稍斜地把接种环在火焰上烧灼。顶端的环必须烧红，以彻底灭菌。环以上凡接种时可进入试管的部分，也应通过火焰烧灼。烧灼时，应把环置于酒精灯的外焰上。4.5 使用右手的小指和手掌之间以及无名指与小指之间，在火焰旁分别拔出两支试管的棉塞，持住。再将试管口在火焰上通过，以杀灭管口可能沾污的细菌，但勿烧烫。4.6 先将烧灼过的接种环插入菌种管内，先接触无菌苔生长的培养基上，如有熔印则表明接种环未冷却，能烫死细菌。一定待冷后，再从斜面上挑起菌苔少许。取出时接种环不能通过火焰，应在火焰旁迅速插入接种管，在斜面上轻轻划线接种。划线时一般先由下而上划一直线后，再由下而上划曲线。操作过程应迅速，勿使菌苔沾至管壁或管口。4.7 当接种完毕，立即将管口通过火焰灭菌，右手到火焰旁塞上棉塞，不要将管口离开火焰旁去迎接右手的棉塞。最后将接种环烧灼灭菌放置原处，再把可能未塞紧的棉塞塞紧，即可进行培养。4.8 操作过程中，如因不慎使棉塞触及火焰而着火，切勿用口吹，须在刚刚着火时迅速塞入试管，因管内氧气不足会很快熄灭。若棉塞外端着火，可用手捏熄。若棉塞烧坏不宜再用，可另取未接种斜面培养基上的灭菌棉塞，代替塞上。附 件：1.阳性对照菌种销毁记录（SOP09-824-01/00） 2.菌种传代记录（SOP09-824-02/00）3.检定菌种领用记录（SOP09-824-03/00）
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